摘要
背景 三阴性乳腺癌(triple-negativebreastcancer，TNBC)是一种特殊表型的乳腺癌亚型，具有疾病进展迅速、内脏转移出现较早、生存率较低等特点。目前尚缺乏针对TNBC的治疗指南，多参照非三阴性乳腺癌（non-triple-negativebreastcancer，NTNBC）的治疗，包括外科手术治疗、放疗、化疗等,因此准确识别TNBC有效靶点和研制新型靶向治疗药物具有重大的意义。研究表明，肿瘤浸润CD8+T细胞与TNBC患者的预后相关,CD8+T细胞数量较高预示着患者有更长的无复发生存期和乳腺癌特异性生存期。而肿瘤浸润CD8+T细胞的数量受到免疫调节因子T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域家族-3(Tcellimmunoglobulinandmucin-domaincontainingmoleculesfamily-3,TIM-3)的调控。CD8+T细胞一旦表达Tim-3这种共抑制分子，将导致CD8+T细胞数量减少，患者的预后也因此变差。此外，TIM-3在多种肿瘤组织中有表达，TIM-3水平越高，患者的预后越差。因此，研究TNBC肿瘤组织及肿瘤浸润CD8+T细胞中TIM-3的表达情况，对于寻找潜在新的TNBC独立预后指标及治疗靶点具有重要的意义。 目的 用免疫组化方法检测CD8+T细胞和TIM-3在TNBC和NTNBC组中肿瘤组织中的表达，分析其与临床病理特征及预后的关系；并用免疫荧光双染法检测TIM-3在肿瘤浸润CD8+T细胞上的表达情况，进一步了解TIM-3对TNBC免疫微环境的调节与肿瘤预后的关系，探讨TIM-3能否作为潜在新的TNBC独立预后指标及治疗靶点之一。 方法 选取2012年1月至2014年12月入住福建医科大学附属龙岩市第一医院甲状腺乳腺外科的TNBC患者40例作为研究组；对照组选择同期的120例NTNBC患者及40例乳腺纤维腺瘤、40例癌旁组织（其中TNBC10例，NTNBC30例，距离肿瘤边缘5cm的正常组织中取材）。 1.统计分析各病例的临床资料，主要包括患者的年龄、月经状态、临床分期、组织学分级、肿瘤的大小、腋窝淋巴结转移情况、Ki-67水平等。 2.通过免疫组织化学的方法，检测研究组与对照组石蜡标本中肿瘤浸润CD8+T细胞、TIM-3的表达情况，统计分析其表达差异与临床病理特征的关系。 3.对于肿瘤浸润CD8+T细胞高表达的标本，进一步应用免疫荧光双染法检测TIM-3、CD8共表达情况，分析TIM-3对TNBC免疫微环境的调节与肿瘤恶性程度的关系。 结果 1.TNBC组在＜45岁、Ki-67高表达、组织学分级Ⅲ级、淋巴结转移阳性、生存率等因素方面所占构成比明显高于NTNBC组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。 2.TNBC组、NTNBC组中肿瘤浸润CD8+T细胞和TIM-3的阳性表达率均明显高于乳腺纤维腺瘤组及癌旁组织（P＜0.05）。TNBC组中肿瘤浸润CD8+T细胞阳性表达者其WHO分级常较低、无瘤生存率较高（P＜0.05），但与患者的分子学分型、Ki-67、临床分期无关（P＞0.05）。TNBC组、NTNBC组中TIM-3的阳性表达率均在有腋窝淋巴结转移、临床分期较晚、复发或转移率高时较高（P＜0.05）。TNBC组中TIM-3在Ki-67高表达的阳性率大（P＜0.05）。 3.TNBC组中TIM-3与肿瘤浸润CD8+T细胞免疫双荧光共表达的阳性表达率均明显高于NTNBC组和乳腺纤维腺瘤组（P＜0.05）。TNBC组中TIM-3与肿瘤浸润CD8+T细胞共表达的阳性表达率在Ki-67较高、WHO分级较高时较高。 结论 1.TNBC患者较NTNBC患者在临床上具有发病年龄早、组织学分级高、容易发生转移、预后差等特点。 2.CD8+T细胞和TIM-3在乳腺癌上都有较高的阳性表达。TNBC恶性程度与CD8+T细胞的阳性表达率呈负相关，CD8+T细胞阳性表达者其WHO分级常较低、无瘤生存率较高；而NTNBC的恶性程度与CD8+T细胞的阳性表达率无明显相关。TIM-3的阳性表达率高低与乳腺癌恶性程度呈正相关，TIM-3阳性表达者其腋窝淋巴结转移率较高、临床分期较晚、复发或转移率较高。此外，TIM-3的阳性表达在TNBC组中与KI-67的表达高低呈正相关，而NTNBC组没有明显差异，表明TIM-3在TNBC中可能促进肿瘤的增殖、进展或者转移。 3.在TNBC组中Ki-67较高、WHO分级较高的患者，TIM-3和CD8+T细胞共表达率高。共表达结果与TIM-3在乳腺癌恶性程度较高时阳性表达率高基本一致，而不是类似于CD8+T细胞在乳腺癌恶性程度低时阳性表达率高，推测TNBC预后不好病例中虽然表达CD8+T细胞，但预后不良可能与其TIM-3和CD8+T细胞的共表达密切相关。TIM-3在TNBC免疫调节中起负性调节的作用，TIM-3对CD8+T细胞的功能具有抑制作用。 4.TIM-3在乳腺癌免疫调节中可能起负性调节的作用，TIM-3有望成为一种针对三阴性乳腺癌新兴的治疗靶点或潜在的独立预后因子。
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