摘要
目的:通过16SrDNA测序分析肥胖儿童和正常体重儿童肠道菌群组成结构及差异性,为解决儿童肥胖的治疗及预防问题打下了一定的基础。 方法:选取安徽医科大学第二附属医院门诊的肥胖儿童30名和安徽省某小学正常体重儿童29名,收集粪便,采用16SrDNA的检测方法,进行DNA的提取与检测,PCR的扩增、产物纯化、文库制备与库检,在机器上对IonS5TMXL进行测序,并通过单端测序构建小片段文库用于末端测序,通过切割和过滤读数,OUTs聚类,最后进行物种注释,丰度分析,多样性分析,以了解肠道微生物的组成和肠道菌群之间的差异。 结果:在OUT注释中肥胖儿童和正常体重儿童cleanreads平均数目分别为79963.3和80860.7,表明肥胖儿童中最终用于后续分析的序列较正常体重组少。在AlphaDiversity中Chaol和ACE两个指数不存在显著性差异,表明肥胖组和正常体重组儿童物种丰富度是一致的。Shannon和Simpson两个指数间也不存在显著性差异,表明肥胖组和正常体重组儿童物种的多样性是一致的。肥胖组儿童和正常体重组儿童在门、纲、目、科、属水平上物种丰度排名前十的物种组成基本相似但所占比例不同。在门水平中厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门是儿童肠道微生物群落中最丰富的菌群。其中疣微菌门、酸杆菌门的数量在正常体重组儿童显著高于肥胖组儿童。肥胖组的丹毒丝菌的数量在纲、目、科水平上高于正常体重组。在属水平,发现嗜黏蛋白阿克曼嗜菌、马赛菌属、Candidatus-Udaeobacter、酸酐菌属、Gammaproteobacteria、慢生根瘤菌属在正常体重组儿童明显高于肥胖组儿童。Dorea在肥胖组儿童明显高于正常体重组。在种水平发现嗜黏蛋白阿克曼嗜菌、梭壮芽孢杆菌、埃氏慢生根瘤菌、Bacterodies-thetaiotaomieron的数量在正常体重组儿童明显高于肥胖组儿童。Bacteroides-massiliensis、产气夹膜梭菌、Dorea-longicatena的数量在肥胖组儿童明显高于正常体重组。 结论:通过16SrDNA测序发现肥胖组儿童和正常体重组儿童的肠道菌群的物种丰富度及多样性分析是一致的。肠道菌群的分布规律和数量影响着肥胖的发生。