摘要
目的:体外探究降钙素基因相关肽(CGRP)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)成骨分化和成血管能力的影响。 方法:采用组织块法分离培养hPDLSCs，流式细胞仪和免疫组织化学法鉴定细胞。给予不同浓度的CGRP(0 mol/ L、10-10mol/ L、10-9mol/ L、10-8mol/ L、10-7mol/L)处理，CCK-8法分析CGRP对hPDLSCs增殖能力的影响，RT-PCR技术在培养的第3、7、14天RT-PCR技术检测碱性磷酸酶(ALP)、核心结合因子2(RUNX2)、骨钙素(OCN)、血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA表达，Westernblot法检测Runx2、OCN、VEGF蛋白表达。成骨诱导7d后行ALP染色，成骨诱导21d行茜素红染色。 结果:从人牙周膜组织中分离培养的细胞经鉴定符合间充质干细胞的特征。CCK-8结果显示，CGRP在一定范围内可促进hPDLSCs的增殖(P<0.05)。RT-PCR和Westernblot结果显示，10-8mol/L的CGRP可显著上调ALP、RUNX2、OCN、VEGF基因和蛋白的表达(P<0.05)。ALP和茜素红染色结果显示，10-8mol/L的CGRP可显著促进hPDLSCs成骨分化过程中ALP的表达和钙结节的形成。 结论:10-8mol/L的CGRP可促进hPDLSCs体外成骨分化和成血管能力。
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