摘要
鹿皮胶是以鹿科动物梅花鹿(Cervus nipportT.)或马鹿(Cervus elaphusL.)的皮为原料熬制而成,具有补血益气、补肾壮阳等功能。目前主要存在的问题是鹿皮胶的原料难以鉴定、熬制工艺、药理作用以及质量标准研究工作还不完善。鉴于上述问题,本文利用DNA条形码技术,对不同鹿种的鹿皮进行鉴定区分,建立了新的鉴别方法;同时对鹿皮胶的熬制工艺进行了改进;并对鹿皮胶的免疫调节作用进行深入研究,具体的研究结果如下: 1.鹿皮种类及真伪的DNA条形码鉴定 基于样品的COI条形码序列,建立NJ树分析正品鹿皮与混伪品的区别。NJ树结果显示,正品梅花鹿鹿皮和马鹿鹿皮分别聚集为独立的一支,支持率为100%,有明显的单系性。混伪品样品也分别聚集为单独的一支,支持率为100%。本研究证明基于COI序列的DNA条形码技术可以有效鉴别鹿皮真伪。 2.鹿皮胶的熬制工艺研究 以出胶率、总蛋白含量和综合评分为主要考察指标,通过正交实验优选,通过直观分析及方差分析可知,煎煮次数(B因素)水平变化对实验结果有显著影响,结合实际生产需要,熬制条件调整为A2B3C1,即:加10倍量水,煎煮5次,每次2小时,即为煎煮5次,每次加入10倍量水,每次2小时。 3.验证鹿皮胶的免疫调节作用 采用腹腔注射环磷酰胺(Cy)法建立小鼠免疫低下模型,研究鹿皮胶的免疫调节作用,结果显示鹿皮胶对免疫低下小鼠的脏器指数,脾淋巴细胞增殖都有促进作用,可以增强小鼠腹腔MΦ能量代谢水平和吞噬中性红的能力,提高外周血CD4+、CD8+细胞数,和CD4+/CD8+的比值,实验证明鹿皮胶具有一定的免疫调节作用。 4.鹿皮胶质量标准建立 参照2015版《中华人民共和国药典》阿胶项下检测指标,我们对自制10批鹿皮胶样品的水分、重金属、水不溶物及氨基酸含量进行了测定,综合10批样品检测结果,暂定鹿皮胶水分含量不超过15%;Pb的含量不超过1.36mg/kg,Cd的含量不超过0.1mg/kg,As的含量不超过0.1mg/kg,Hg的含量不超过0.1mg/kg,Cu的含量不超过0.83mg/kg;水不溶物含量不超过2%;氨基酸总含量不低于80%。