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伏马毒素B1和T-2毒素荧光免疫层析试纸条的研制

张滢

伏马毒素B1和T-2毒素荧光免疫层析试纸条的研制

张滢1
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  • 1. 天津科技大学
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摘要

本文建立了四种用于检测伏马毒素B1(FB1)和T-2毒素(T-2)的可视化荧光免疫层析试纸条方法,四种方法均可用于玉米、大米、小米和大麦四种谷物样品中FB1和T-2的快速检测。 FB1量子点标记免疫层析试纸条(FB1-QDICA)研制过程中,采用活化酯法制备了量子点-抗体(QDs-Ab)偶联物,并确定了试纸条最佳工作条件:量子点、抗体、活化剂的最佳偶联摩尔比为1∶2∶1500:试纸条最适上样缓冲液为pH7.4PB;羊抗鼠IgG和包被原(FB1-OVA)稀释倍数分别为400倍和40倍;QDs-Ab和工作液最佳添加量分别为0.3此和5μL;FB1-QDICA的可视化检测限为2μg/L,在样品中检测限为20μg/kg。 FB1量子点荧光猝灭免疫层析试纸条(FB1-FQICA)的研制过程中,制备了量子点标记鸡卵白蛋白(QDs-OVA)偶联物和胶体金标记抗体(AuNPs-Ab)复合物,并确定了试纸条最佳工作条件:制备AuNPs-Ab时K2CO3和抗体最佳添加量分别为20μL和25μL;试纸条缓冲液为pH7.4PBS;FB1-OVA和QDs-OVA偶联物的稀释倍数分别为1∶10稀释和20倍;AuNPs-Ab最佳添加量为3μL;FB1-FQICA的可视化检测限为1μg/L,样品中检测限为10μg/kg。 T-2量子点荧光猝灭免疫层析试纸条(T-2-FQICA)的最佳工作条件为:K2CO3和抗体最佳添加量分别为10μL和50μL;试纸条缓冲液为pH7.4PBS;包被原(T-2-OVA)和QDs-OVA偶联物的稀释倍数分别为1∶12稀释和20倍;AuN-Ps-Ab最佳添加量为3μL;T-2-FQICA的可视化检测限为2μg/L,样品中检测限为20μg/kg。FB1和T-2多残留荧光猝灭免疫层析试纸条方法的可视化检测限分别为1μg/L和2μg/L;样品中检测限分别为10μg/kg和20μg/kg,检测时间15min。通过交叉反应测得四种试纸条检测方法特异性良好,实际样品分析结果显示方法与商业化ELISA试剂盒测定结果一致。

关键词

农产品/伏马毒素B1/T-2毒素/荧光免疫层析试纸条/安全检测

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授予学位

硕士

学科专业

农产品加工及贮藏工程(工)

导师

王俊平

学位年度

2019

学位授予单位

天津科技大学

语种

中文

中图分类号

TS
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