摘要
作为中国传统食用真菌，蛹虫草被广泛用作药用及民间滋补食品。多糖是蛹虫草重要的活性成分之一，具有丰富的生物活性，近年来多糖降血糖活性受到很多关注。本文对蛹虫草胞外多糖的结构进行表征，分析了培养条件对胞外多糖产量与多糖合成酶的影响，同时对胞外多糖的降血糖活性进行研究，得到以下结果。 蛹虫草液体发酵过滤得发酵液，通过乙醇沉淀、除蛋白、除色素后获得胞外粗多糖，苯酚硫酸法测定其多糖含量为33.59％。粗多糖经Sephadex G-200分离纯化得纯多糖，命名为EPS，多糖含量为65.32％，以葡聚糖为标品，高效液相色谱测得分子量为1.56×103kDa。采用比旋光度，红外谱图，核磁共振，单糖组成及甲基化等方法分析EPS结构。结果表明，EPS比旋光度为.85°，单糖由甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，摩尔比为1.68∶1∶1.83。EPS糖苷键连接方式为:主链以(1→4)连接的半乳糖为主，(1→3)连接的半乳糖和葡萄糖，(1→3，6)连接的甘露糖，(1→4)连接的甘露糖存在于主链或支链中。刚果红实验表明EPS在0.25.0.30mol L-1的NaOH溶液中存在三股螺旋结构。扫描电镜结果为:EPS表面形貌呈树枝状并相互交织，呈现大小不均的凹陷。 探究发酵条件对蛹虫草胞外多糖产量与多糖合成酶的影响。结果表明在培养条件为:葡萄糖4％、牛肉膏1％、CaCO30.05％、pH7、发酵时问5d时，胞外多糖含量与磷酸葡萄糖变位酶(PGM)、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)和磷酸葡萄糖异构酶(PGI)活力较高，其中与胞外多糖产量相关性最高的是PGM和UGP。 对蛹虫草胞外多糖的降血糖活性进行研究。EPS的体外抗氧化能力结果表明:在EPS浓度为3mg mL-1时，对DPPH自由基、·OH自由基、O2-·自由基、ABTS的清除能力分别达到53.7±1.63％、45.4±1.56％、23.7±1.02％及46.7±1.41％，说明EPS具有抗氧化能力，通过影响氧化应激反应为治疗糖尿病提供了可能。体外α-葡萄糖苷酶抑制实验表明:胞外多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率随着多糖纯度及浓度的增加而增强。小鼠降血糖模型结果表明:中、高剂量的EPS能够更好的降低小鼠血糖值;恢复糖耐受能力;改善脂代谢紊乱现象;对受损肝脏、肾脏组织有修复和保护功效。
NETL