摘要
食物过敏是指机体对摄入的食物过敏原产生的变态免疫反应，其发病率呈现逐年上升趋势，临床症状表现多样，严重影响过敏人群的生活质量。近年来研究发现天然活性物质具有减轻食物过敏反应的潜力，且具有安全、来源广和品种多样等优势，而逐渐成为食物过敏研究领域的热点。本研究通过检测大鼠嗜碱性粒细胞（rat basophilic leukemia，RBL）-2H3脱颗粒及细胞活力，对118个植物来源单体化合物的抗过敏活性进行筛选，选择了石吊兰素（nevadensin，NEV）和二氢杨梅素（dihydromyricetin，DMY）进行深入的抗食物过敏活性研究。NEV和DMY是从吊石苣苔中提取得到的2种黄酮，纯度均大于98%，能够显著抑制RBL-2H3细胞脱颗粒，其半抑制率浓度分别为14.59±3.34μM、15.89±4.28μM。 通过腹腔注射卵清蛋白（ovalbumin，OVA）/Alum混合液致敏，口服灌胃OVA刺激，构建Balb/c小鼠食物过敏模型。发现NEV和DMY均能缓解过敏小鼠的腹泻、体温低的症状，降低小鼠血清OVA特异性免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）E抗体、肥大细胞蛋白酶和组胺的水平。与NEV不同的是，DMY还能显著促进白介素10的分泌；利用流式细胞术检测DMY对小鼠脾脏淋巴细胞分群的影响，发现DMY能够抑制B淋巴细胞、肥大细胞的增殖，促进调节性T细胞的分化。构建小鼠被动皮肤过敏反应模型，发现NEV和DMY均能显著减少小鼠耳朵蓝斑，进一步验证了二者对肥大细胞的抑制作用。 利用RBL-2H3细胞和骨髓来源肥大细胞（bone marrow-derived mast cells，BMMCs）模型，探究NEV和DMY的抗过敏作用机制。发现NEV和DMY能够抑制RBL-2H3细胞脱颗粒和组胺的释放，也可抑制BMMCs细胞脱颗粒。此外，NEV还能降低BMMCs细胞c-Kit受体的表达，抑制BMMCs细胞增殖，诱导BMMCs细胞发生早期凋亡。DMY不能显著诱导BMMCs细胞发生凋亡，但可阻断IgE与RBL-2H3细胞、BMMCs细胞表面IgE高亲和力受体FcεRI的相互作用。通过分析5种黄酮对RBL-2H3细胞脱颗粒抑制作用与结构间的关系，发现其作用强弱与其结构中的甲氧基和羟基的数量及位置、B环中双键等有关。 综上所述，吊石苣苔黄酮NEV和DMY均具有缓解小鼠食物过敏反应的作用，其中以NEV的作用较强。但二者作用机制存在差异，NEV能降低肥大细胞c-Kit受体表达，而DMY则能阻断IgE与肥大细胞FcεRI受体的相互作用。该研究结果可为抗食物过敏的原料药或特殊食品的研发提供理论依据。
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