摘要
目的： 通过解毒益智方中提取的多糖混合物冻干粉对AD转基因线虫行为学和分子学方面的研究，探讨不同浓度多糖混合物对Aβ聚集所导致线虫瘫痪、死亡、氧化应激反应相关基因表达量的影响，从而明确多糖混合物是否能够抑制线虫的瘫痪、延长线虫的寿命，以及是否可以减少氧化应激的发生。 方法： 采用Aβ1-42诱导的线虫CL4176作为实验模型，线虫经同期化处理后随机分为四组，分别是浓度为20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的给药组和对照组。做瘫痪行为实验和寿命实验时，每组30只线虫，先在16℃培养48h后转移到25℃环境中诱导32h，观察线虫的瘫痪和死亡情况，并记录数据；氧化应激基因表达实验时，每组300只线虫，在16℃培养96h后转移到25℃诱导48h，将线虫按试剂盒说明操作提取RNA进行实时定量PCR，检测氧化应激反应相关基因表达情况。每个实验重复3次。 结果： 1、瘫痪行为实验：行为学实验初步证实三个浓度的给药组与对照组相比可以有效抑制AD线虫瘫痪（P＜0.05），其中80μg/mL给药组抑制作用最明显（P＜0.01）。 2、寿命实验：三个浓度的给药组与对照组相比可以有效提高AD线虫生存率（P＜0.05），其中80μg/mL浓度的给药组与对照组相比，平均寿命延长23.97%（P＜0.01）；40μg/m L浓度的给药组与对照组相比，平均寿命延长19.28%（P＜0.05）。 3、氧化应激基因表达实验：与对照组相比，三个浓度给药组中da f-2基因表达量均可极显著下调（P＜0.01）；20μg/mL给药组线虫体内的daf-16和sod-3基因表达量显著上调（P＜0.05）；40μg/mL给药组线虫体内daf-16、sod-3基因表达量极显著上调（P＜0.01），gst-4基因表达量显著上调（P＜0.05）；80μg/mL给药组线虫体内daf-16、sod-3、gst-4基因表达量极显著上调（P＜0.01），hsf-1、hsp-16.2基因表达量显著上调（P＜0.05）。 结论： 1、解毒益智方中多糖混合物可以减缓线虫的瘫痪行为，延长线虫的寿命，为神经保护提供可靠基础。 2、多糖混合物对线虫的保护作用是通过调节氧化应激反应相关基因实现的，其可以上调daf-16、hsf-1、hsp-16.2、sod-3、gst-4基因的表达量和下调daf-2基因的表达量，其效果与浓度呈正相关。 3、对于AD转基因线虫，本着早期、足量、长期的用药原则，可以更好的发挥神经保护和延缓衰老作用。
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