摘要
肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病。肿瘤的发生与防治研究过去是、现在是、并在将来一定时期内仍将是生命科学研究的热点。现在的治疗方法首选手术切除，配合放疗化疗，但放疗化疗有严重副作用。因此，研究肿瘤发生与发展的分子机制，探索肿瘤基因治疗的新技术、新方法，具有十分重要的意义。 二十世纪九十年代，随着分子生物学、肿瘤学及病毒学本身的发展，肿瘤发生的分子机制，细胞与病毒间的作用机制，信号传导通路，凋亡抑制与诱发机制等逐渐被阐明，用病毒治疗肿瘤成为研究的热点。这种能选择性地在肿瘤细胞中复制，并进一步杀灭肿块，被称为条件性复制病毒或选择性复制病毒(conditional replicative viruses)，或溶瘤病毒(oncolytic vlruses)。 本室肖庚富和兰萍博士构建的缺失凋亡抑制基因icp34.5的单纯疱疹病毒(mtHSV)就是一种有靶向性的溶瘤病毒。本实验研究了mtHSV在体外和体内的选择性杀瘤效应。 研究了mtHSV对2种人正常细胞和6种人肿瘤细胞的体外效应。我们发现它能选择性地在多种人癌细胞中复制，对入神经胶质瘤U251细胞、人膀胱癌EJ细胞、人肝癌Hep-3B细胞、人喉癌Hep-2细胞等杀伤效率较高，对人肺腺癌A549细胞、人肺癌SPC-AI细胞作用不显著，而对人成纤维细胞(MRC-5)和人羊膜细胞(Wish)几乎无影响。 选择了人肝癌细胞Hep-3B作为裸鼠荷瘤细胞株，成功构建了荷人肝癌Hep-3B的裸鼠模型。将125头荷瘤裸鼠分为5组进行治疗，高，中，低3个mtHSV治疗组，1个空白对照组，1个临床药物(阿霉素)对照组。治疗采用瘤内注射，每周1次，共3次，在治疗过程中，隔日测量肿瘤大小，裸鼠体重，观察其生活状态。从第3次治疗后一个星期开始分三批(每周一批)处死裸鼠，眼球取血后，做血常规以及血液生化检查：将其肿瘤，心，肝，脾，肺，肾和大脑分别取材测量重量后，分别做RT-PCR检测，病理切片等。实验结果显示，治疗组有效率达100%，治愈率达到21.5%，动物生活状态良好，无死亡：阿霉素对照组动物出现毒副反应和死亡，空白荷瘤组裸鼠生活状态极差，死亡率达29.17%；以高浓度mtHSV计算，生存期比空白对照组延长11.5天，肿瘤体积减少70.96%；肿瘤重量减少61.78%，PCR检测仅在被治疗裸鼠的肿瘤中扩增出了HSVDNA带；血常规，血液生化和系统尸检等结果表明mtHSV对治疗裸鼠基本无副作用。 以上结果充分表明，mtHSV能靶向性和选择性地杀死肿瘤细胞，对正常细胞和组织安全，是一种很有前途的癌症基因治疗药物。
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