摘要
本研究通过在体大鼠心肌缺血再灌注损伤动物模型，观察振源胶囊预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及其分子机制。 将Wistar大鼠随机分为Sham组、MI/R组、振源胶囊（300、600 mg/kg）剂量组和前列地尔组。通过结扎大鼠冠状动脉左前降支，缺血2 h，再灌注2 h建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。彩色多普勒超声检测大鼠心脏功能；测定心肌梗死面积；生化试剂盒测定血清中CK-MB、AST及LDH活性；分光光度法检测心肌组织中SOD、GSH-Px、CAT活性和 MDA含量；心肌组织 H&E染色；TUNEL法检测心肌组织凋亡；Western Blot检测心肌组织中凋亡相关蛋白、自噬相关蛋白Atg5、Beclin1、LC3Ⅰ/Ⅱ和p62以及PI3K/Akt/mTOR通路中相关蛋白的表达及其磷酸化水平。 1.振源胶囊300、600 mg/kg均能使 MI/R大鼠 LVIDd、LVIDs减少，同时增加LVEF、LVFS，说明振源胶囊可明显改善心肌缺血再灌注损伤大鼠的心功能；与 MI/R组比较，振源胶囊300、600mg/kg均可明显降低大鼠心肌梗死面积；振源胶囊减轻MI/R大鼠心肌组织的病理学损伤改变，同时可降低MI/R大鼠血清中CK-MB、AST和LDH活性，提示振源胶囊可保护心肌缺血再灌注损伤。 2.与MI/R组比较，振源胶囊300、600 mg/kg能降低心肌组织中MDA含量，升高SOD、CAT和GSH-Px活性，提示振源胶囊可能通过抑制氧化应激反应发挥心肌保护作用。 3.TUNEL染色结果显示，与MI/R组比较，振源胶囊300、600mg/kg组可明显降低心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数；Western Blot检测发现，振源胶囊300、600 mg/kg上调Procaspase-3、Procaspase-9和Bcl-2蛋白表达水平，下调Bax蛋白表达水平，提示振源胶囊可抑制MI/R损伤大鼠的心肌细胞凋亡。 4. Western Blot结果显示，振源胶囊预处理可明显下调 MI/R大鼠心肌组织 Atg5、Beclin1及LC3Ⅰ/Ⅱ的蛋白表达，上调p62的蛋白表达，提示振源胶囊抗心肌缺血再灌注损伤作用与抑制自噬密切相关；而振源胶囊可明显增加MI/R大鼠心肌组织中PI3K、Akt和mTOR的磷酸化水平，提示振源胶囊可通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路抗心肌缺血再灌注损伤。 本研究证实了振源胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用，并初步阐述了其作用机制可能是激活PI3K/Akt/mTOR信号通路，抑制自噬，发挥大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用。
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