摘要
食品安全是全社会高度关注的话题，微生物的检验成为鉴定食品质量的重要依据。微生物污染物的来源主要是食源性致病性的微生物如沙门氏菌。传统的检测方法操作繁琐，费时费力。单一的检测模式不能满足对微生物的可靠性检测，要建立不同原理的检测技术充实微生物的检测方法。因此，我们开发了一种快速检验食品中沙门氏菌的检测方法。我们制备的功能化Au-Fe3O4纳米粒子，它由不同特性的两部分组成：一部分是具有磁学性质的Fe3O4，一部分是具有光学性质的Au，实现了利用纳米材料的双功能对沙门氏菌进行检测。 第一部分 我们利用油胺作为还原剂还原四氯金酸三水合物合成了油溶性的Au纳米粒子。以预先合成的金纳米粒子作为种子，再使高温热解Fe(CO)5生成的铁纳米粒子长在金纳米粒子的表面。材料暴露在空气中，表面的铁纳米粒子被氧化成四氧化三铁。采用配体交换法制备出氨基化Au-Fe3O4纳米粒子，测出的磁滞回线显示氨基修饰后的Au-Fe3O4纳米粒子饱和磁化强度为23.191emu/g，紫外吸收光谱显示562nm处出现了吸收峰。利用氨基化纳米粒子的氨基与沙门氏菌多克隆抗体的羧基进行反应，最终制备出免疫功能化的纳米粒子。运用考马斯蓝法测定抗体含量进而确定材料负载蛋白质的能力，结果表明1mg免疫化Au-Fe3O4纳米粒子可以负载34.6μL的抗体。 第二部分 我们测定了沙门氏菌的生长曲线并利用磁学光学双模式对沙门氏菌的检测方法进行探究。经过反复实验，为了提高了检测的准确性，有效降低假阳性率，我们规定当横向弛豫时间变化值小于50ms时，核磁共振检测被认定为非检测水平。我们又对体系中的反应条件进行了优化，最终确定反应体系材料的最佳浓度为0.3mg/mL，最佳孵育时间为40min，材料可稳定存放7天，核磁共振检测目标菌的浓度范围为1~104CFU/mL，紫外吸收可检测沙门氏菌的浓度范围是从103~107CFU/mL。最后我们运用该方法对牛奶样品中沙门氏菌进行了检测，结果表明仍具有特异性，为以后在其他微生物方面的应用提供参考和借鉴作用。
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