摘要
肝纤维化是多数肝病共同的病理过程，即在各种致病因子作用下肝脏内细胞外基质(extracellular matrix，ECM)发生过度沉积，从而影响肝脏的生理结构和功能，如不及时抑制或逆转，则会加速肝硬化或肝癌的发生，严重影响人体的生存质量。目前单一控制病因或中药保肝是治疗肝纤维化的主要方式，临床上无针对肝纤维化治疗的化学合成药物。尽管近年来抗纤维化药物的研发取得了一定的进展，但一些候选药物在临床试验中难以达到预期的治疗效果或出现副作用。传统中药在人类疾病的防治中发挥着重要作用，从中分离得到的天然产物由于结构多样、具有多种生物活性等特点为寻找新的抗肝纤维化活性成分或先导化合物提供了丰富的资源。蒿属植物野艾蒿(Artemisia lavandulaefolia)在民间常作为“艾(A.argyi)”的代用品，具有温经止血、散寒祛湿之功效。目前现有文献未见野艾蒿抗肝纤维化活性成分报道。 我们研究首次发现野艾蒿乙醇提取物对肝星状细胞(hepatic stellate cell line LX2，HSC-LX2)具有抑制活性，在400μg/mL时其抑制率达94.1％。为寻找野艾蒿抗肝纤维化活性成分，本课题以抗肝纤维化活性为导向，结合各种分离纯化和结构鉴定手段(UV,IR，NMR，HRESIMS，ECD和X-Ray单晶衍射)，从野艾蒿中分离并鉴定了45个化合物，其中新化合物13个，分别是:1，2-裂环的桉烷倍半萜artemilavanolides C～F(1-4)、桉烷型倍半萜artemlavandulolides A～G(5-10和19)和artemlavanin B(26)、重排桉烷型倍半萜artemlavanin A(29)。对分离得到的化合物进行活性筛选，结果表明30个化合物具有较明显的HSC-LX2细胞毒性，4个化合物(11S)-1β-hydroxyeudesm-3-eno-12，6α-lactone(13)、santamarine(14)、reynosin(16)和dehydroleucodin(31)的活性较强，IC50分别为52.1、16.5、21.3和35.1μM，是阳性药物水飞蓟宾(IC50,161.5μM)活性的3～8倍。对以上4个活性化合物进行了细胞外基质研究，结果表明其中3个化合物具有抑制细胞外基质分泌的作用。化合物14、16和31对HSC-LX2细胞中Ⅰ型胶原蛋白(human collagen typeⅠ，ColⅠ)具有抑制作用，其IC50分别为7.3、9.6和10.7μM;化合物31对人体透明质酸(human hyaluronic acid，HA)具有抑制作用，其IC50为24.5μM;化合物14和31对人层粘连蛋白(human laminin，HL)具有抑制作用，其IC50分别为18.6和13.3μM。综上所述，化合物14，16和31具有较强的HSC-LX2细胞抑制活性，初步的细胞外基质研究表明，化合物16对ColⅠ有抑制作用，化合物14对ColⅠ和HL均有抑制作用，化合物31对三种细胞外基质ColⅠ、HA和HL都有抑制作用。本研究初步揭示了野艾蒿的抗肝纤维化活性成分，特别是化合物31值得进一步结构优化、深入构效关系和作用机制，有望开发为新型抗肝纤维化候选药物分子。 本文还综述了近20年具有抗肝纤维化药用植物研究进展。至今，50种药用植物的提取物具有抗肝纤维化作用，其主要的化学成分涉及黄酮、生物碱、萜、多糖和多肽类;已报道抗肝纤维化单体成分有68个，包括23个黄酮、21个生物碱、16个萜类、8个酚类化合物。药理研究表明，这些抗肝纤维化活性成分的作用机制与抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSCs)的激活、细胞外基质的合成、炎症反应、氧化应激反应和促进肝细胞的再生等相关。
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