摘要
目的： 抑郁症(Depression)是一组以显著且持久的情绪低落、快感缺失为主要特征的心境障碍疾病。D-丝氨酸(D-serine)是一种主要由星形胶质细胞分泌的重要的神经递质，在神经系统分布广泛，主要功能是调节N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor，NMDAR)的功能。几项前期研究表明，内源性D-丝氨酸可能与抑郁症的发生相关；但是其中涉及的具体作用机制却报道甚少。此次研究目的是系统地评估D-丝氨酸对伏隔核(nucleus accumbens，NAc)介导的抑郁行为的影响。 方法： 实验组小鼠经过慢性社会挫败应激(Chronic social defeat strss，CSDS)后，通过社会接触行为实验的接触时间将C57小鼠分为易感组(Suscep组)和非易感组(Unsuscep组)。用高效液相色谱法(High performance liquid chromatography， HPLC)分别测定对照组(Control组)、易感组、非易感组中伏隔核(NAc)及海马区(Hippocampus，Hip)D-丝氨酸的浓度。然后分别通过腹腔注射生理盐水、D-丝氨酸、阳性对照氟西汀(Fluoxetine)，观察其行为学变化，社会交往率和蔗糖偏嗜度用于评估抑郁行为的指标。通过Westernblot分析丝氨酸消旋酶(Serine racemase，SR)，D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase，DAAO)，环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein，CREB)和上游激酶如细胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase，ERK)、钙依赖性蛋白激酶II(Calmodulin-dependent protein kinase II ，CAMKII)的表达。通过电生理方法探索小鼠伏隔核脑片中的长时程抑制(Long-term Depression， LTD)变化。 结果： (1 )HPLC结果显示，易感组小鼠伏隔核脑区D-丝氨酸浓度明显降低(p<0.05vs.Control组)；同时Westernblot结果显示丝氨酸消旋酶SR表达明显降低(p<0.05vs.Control组)，而D-氨基酸氧化酶DAAO表达明显增加(p<0.05vs.Control组)。 (2)易感组小鼠腹腔注射D-丝氨酸后，社会交往率及蔗糖偏嗜度明显增加(p<0.05vs.NaCL组)；继续观察三组不同浓度D-丝氨酸及氟西汀注射后，社会交互率及蔗糖偏嗜度明显增加并呈剂量依赖性(p<0.05vs.Suscep组)。 (3)Westernblot结果显示，易感组小鼠CREB及ERK磷酸化水平增加(p<0.05vs.Control组)，而CAMKII磷酸化水平没有明显变化(p>0.05vs.Control组)；三组不同浓度D-丝氨酸均能降低易感组小鼠CREB及ERK的磷酸化水平(p<0.05vs.Suscep组)，但同样不影响CAMKII的磷酸化水平(p>0.05vs.Suscep组)。 (4)电生理结果显示，易感组小鼠伏隔核脑区LTD受损(p<0.05vs.Control组)，而D-丝氨酸及氟西汀处理后可以逆转LTD受损(p<0.05vs.Suscep组)。 结论： 慢性社会挫败应激后，易感组小鼠伏隔核区D-丝氨酸浓度降低，可能与其关键酶SR、DAAO的变化有关；腹腔注射外源性D-丝氨酸或阳性对照氟西汀能够明显改善易感组小鼠的抑郁行为学指标(如社会交互率及蔗糖偏嗜度)，并逆转伏隔核脑区LTD损伤及伏隔核ERK-CREB通路相关蛋白的磷酸化表达。
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