摘要
目的：乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界上最常见的病毒感染，HBV感染所致的各种肝脏疾病是具有生命威胁性的全球性的健康问题。HBV大包膜蛋白(LHBs)上的preS1结构域是病毒最重要的结构之一且暴露在病毒最外层。本研究以preS1为诱饵蛋白捕获发现了与之特异性结合的HSP70，并分析二者之间的作用关系。 方法：为了验证preS1和HSP70相互作用，采用免疫荧光共聚焦(Immunofluorescence，IF)和免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation， co-IP)的方法进行了检测；为了检测临床慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中HSP70的含量，ELISA比较了100例健康人(50例)和CHB患者(50例)的血清样本；为了研究HBV和HSP70的功能关系，分别在瞬转了HBV1.1倍体的HepG2细胞系、稳定表达HBV基因组的HepG2.2.15细胞系和感染了HBV的HepG2-NTCP细胞系中检测HSP70的表达水平；为了研究HSP70对HBV的影响，qRT-PCR检测了细胞上清中的HBVDNA拷贝数；为了进一步探索HSP70对HBVDane颗粒的影响，颗粒凝胶实验(Particle gel)检测了上清中HBV的含量。 结果：IF证实了preS1和HSP70在细胞质中存在共定位，co-IP也验证了二者存在特异性结合；ELISA检测临床标本发现CHB患者血清中HSP70含量明显升高(t=2.328，p=0.022)；细胞实验也验证了HBV过表达可以在mRNA和蛋白质水平上调HSP70的表达；qRT-PCR检测发现过表达HSP70增加了细胞培养上清中HBVDNA的拷贝数，虽然ELISA检测上清中HBV表面抗原(HBsAg)和HBVe抗原(HBeAg)的表达不受影响，但特异性检测上清中HBVDane颗粒却发现其分泌增多。 结论：HBVLHBs的preS1结构域可以和HSP70相互作用，且前者促进了后者的表达；反过来，HSP70也以非复制的方式促进了HBVDane颗粒的分泌。
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