摘要
目的： 炎症后肠易激综合征(post inflammatory-irritable bowel syndrome，PI-IBS)是一种发病率呈逐年升高趋势的胃肠道功能性疾病,严重降低患者的生活质量，并且占用大量医疗资源。目前临床应用的主要治疗西药多以改善症状和预防发作为主，疗效不佳且副作用多，而中医药治疗PI-IBS取得了较为显著的疗效。芍药甘草汤(SGD)是具有舒筋柔肝、缓急止痛的经典名方，其在镇痛、抗炎方面的作用受到广泛关注，但是否可缓解PI-IBS的腹痛症状尚未见报道。本论文旨在探究SGD对PI-IBS大鼠腹痛的干预作用及潜在的作用机制。 方法： 采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)制备炎症后肠易激综合征(PI-IBS)大鼠模型，以病变活动指数(DAI)，腹部收缩反射实验(AWR)，结肠组织病理学变化为指标，明确SGD对PI-IBS大鼠腹痛症状的改善作用；以血清及结肠组织为研究对象，采用免疫组织化学法测定结肠组织中嗜铬细胞(EC )细胞数量，UHPLC-QTRAP-MS/MS法测定大鼠血浆中5-HT的水平，分析SGD对PI-IBS大鼠5-HT信号通路的干预作用；最后采用实时荧光定量PCR及westernblot法从基因和蛋白水平阐明5-HT信号通路在SGD改善PI-IBS腹痛中的作用。此外，我们从动物和细胞两个维度，基因和蛋白两个水平明确了TRPV1信号通路在SGD改善PI-IBS腹痛中的作用。 结果： 1.与对照组相比，PI-IBS模型大鼠的DAI明显升高，内脏痛觉敏感性升高(P＜0.05)且结肠组织形态发生病理改变，以上均提示PI-IBS模型制备成功。经SGD治疗14天后上述情况均得到不同程度的缓解且呈现SGD剂量依赖性，表明SGD可剂量依赖性的减轻PI-IBS大鼠腹痛腹泻等症状。 2.TNBS造模成功后，PI-IBS模型大鼠结肠组织中EC细胞数量显着增加(P＜0.01)，血浆中5-HT水平显着升高(P＜0.001)，5-HT合成酶TPH的mRNA水平显著升高，而5-HT转运体SERT的mRNA水平没有差异；SGD处理可以剂量依赖性地逆转以上现象，提示5-HT信号通路在SGD的疗效中起重要作用。 3.在动物水平上，TNBS造模成功后，PI-IBS模型大鼠结肠组织中TRPV1和calcineurinmRNA表达水平升高，同时，TRPV1和p-CaMKII的蛋白质表达增多，提示在PI-IBS模型大鼠中TRPV1的表达及功能增强，SGD可以剂量依赖性地逆转这一现象；在细胞水平上，SGD可以明显抑制HEK293细胞中过度激活的TRPV1mRNA的表达，而对正常HEK293细胞中TRPV1mRNA没有抑制作用。 结论： 本实验结果表明SGD可显著减轻PI-IBS大鼠的腹痛症状，其作用机制可能与调节5-HT信号通路及抑制TRPV1的表达和功能有关。
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