摘要
目的：通过免疫印迹技术（Western blot）对上颌窦真菌球型鼻窦炎和慢性鼻窦炎不伴鼻息肉患者上颌窦黏膜内诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）的表达进行定量分析,探讨iNOS在上颌窦真菌球型鼻窦炎与慢性鼻窦炎不伴鼻息肉患者上颌窦黏膜内的表达差异及其与上颌窦真菌球型鼻窦炎、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉发病的相关性。 方法：收集2017年10月～2019年10月因单侧鼻窦病变就诊于大连医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科全麻下行功能性鼻内窥镜手术治疗的患者共51例。将所有患者分为3组，每组17例，即慢性鼻窦炎不伴鼻息肉组、上颌窦真菌球型鼻窦炎组、正常对照组（单纯上颌窦囊肿）。入组所有患者均排除支气管哮喘、变应性鼻炎、自身免疫性疾病、纤毛不动综合征和囊性纤维化病，且单纯上颌窦囊肿组排除急慢性鼻腔炎性疾病病史。于全麻手术中留取三组患者除送检病理标本外剩余的上颌窦内侧壁黏膜，每组每份黏膜组织质量不小于30mg，迅速置于冻存管中液氮低温保存。自各黏膜组织中提取总蛋白，定量变性后用Western blot法经电泳、电转、封闭、孵育一抗、孵育二抗及显影等步骤检测提取上清液中的蛋白质含量,获得相应免疫印迹图谱,免疫印迹一抗为抗兔iNOS,二抗为山羊抗兔抗体。实验结果用Image studio导入分析各条带灰度值，计算相对蛋白灰度比值，而后将结果导入Graphpad统计软件进行绘图及统计分析。用Spearman相关分析iNOS与上颌窦真菌球型鼻窦炎、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉发病的相关性。检验标准：P＜0.05认为有差异，P＜0.01认为差异有显著性意义；r的绝对值大小决定相关程度。 结果：1.上颌窦真菌球型鼻窦炎组及慢性鼻窦炎不伴鼻息肉组上颌窦黏膜内iNOS的表达均高于单纯上颌窦囊肿组，差异具有统计学意义（P＜0.05）； 2.iNOS在上颌窦真菌球型鼻窦炎组上颌窦黏膜内高表达，与慢性鼻窦炎不伴鼻息肉组相比具有显著差异（P＜0.01）； 3.iNOS的表达与上颌窦真菌球型鼻窦炎发病呈正相关（r=0.6395，P＜0.05），而与慢性鼻窦炎不伴鼻息肉的发病呈弱相关（r=0.3396，P＜0.05）。 结论：1.iNOS与上颌窦真菌球型鼻窦炎的发病呈正相关；而与慢性鼻窦炎不伴鼻息肉的发病呈弱相关；iNOS在上颌窦真菌球型鼻窦炎的发病中起重要作用。 2.鼻窦黏膜内iNOS的定量检测可间接准确地反映鼻窦NO水平。
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