摘要
长寿是人们亘古不变的追求。在医疗技术不断提高的条件下，人类的平均寿命在不断的延长，进而加速了社会老龄化的进程，随之而来的就是各种与衰老相关的疾病的发病率也在逐年上升，如神经退行性疾病中的阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)、代谢性疾病中的糖尿病等。大量研究表明，氧化损伤是直接导致机体衰老及衰老相关性疾病发生发展的重要原因。因此，寻找具有缓解氧化应激作用的药物是对抗衰老研究中的一个重要方向。近年来，低毒高效且资源丰富的天然抗氧化剂成为人们研究的对象，并且在许多的研究中已经证实中药来源的黄酮、多糖等成分具有良好的抗氧化活性。但中药化学成分复杂，药理活性多样，因此加强对中药中单一成分的活性研究，对于增强中药在抗氧化和延缓衰老中的应用具有重要意义。 本文中利用秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans，C. elegans)模型来证明中药秦皮(Cortex Fraxini)中的成分秦皮甲素对氧化应激的缓解作用及其机制。论文先用DPPH和百草枯(PQ)来验证秦皮甲素在体内外两方面的抗氧化活性。在此基础上，将秀丽隐杆线虫的食物摄取率、体长及产卵作为秀丽隐杆线虫处于正常生长状态的指标。结果显示，秦皮甲素具有很好的体外DPPH自由基清除能力和体内抗氧化胁迫能力，并且秦皮甲素对秀丽隐杆线虫的生长发育没有影响。接着通过检测线虫体内酶活、ROS水平及寿命等多个方面来评价秦皮甲素的保护作用。实验结果显示，秦皮甲素不仅可以延长野生型秀丽线虫N2和AD疾病模型CL2006的寿命，还能够增强线虫体内抗氧化防御系统，如增加超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性，并且降低活性氧(ROS)和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平。 接着利用可视化转基因秀丽线虫GR1352、CF1553和CL2070来研究秦皮甲素保护作用的机制。进一步的研究表明，秦皮甲素可促使DAF-16转录因子的入核和应激相关因子sod-3和hsp-16.2的表达。接着通过对线虫模型mRNA测序进一步研究秦皮甲素保护作用的作用机制，并用实时荧光定量PCR对测序结果进行验证，qPCR结果显示秦皮甲素能够增加sod-3、hsp-16.11和hsp-16.2基因的表达量，但不能增加daf-16基因的表达。 上述结果表明，秦皮甲素具有很好的抗氧化活性，对秀丽线虫具有显著的抗氧化和延缓衰老作用，其作用机制可能为激活DAF-16下游抗氧化相关基因活性。
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