摘要
目的： 本研究通过研究雷公藤红素对人白血病多药耐药株K562/ADR细胞抗白血病作用及其增强K562/ADR细胞对阿霉素敏感性的机制，为探索白血病新的治疗药物提供实验数据。 方法： 体外培养人白血病细胞K562及其多药耐药株细胞K562/ADR，通过对K562和K562/ADR细胞进行mRNA测序，筛选差异表达的mRNAs；分别用不同浓度的阿霉素和雷公藤红素处理K562和K562/ADR细胞，48h后采用CCK-8实验检测细胞活力；通过流式细胞仪检测K562/ADR细胞凋亡；利用qRT-PCR与WesternBlot检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达；通过流式细胞仪检测K562/ADR细胞周期；用雷公藤红素与阿霉素联用，48h后采用CCK-8实验检测K562/ADR细胞活力；用不同浓度的雷公藤红素处理K562/ADR细胞，检测其耐药相关基因表达与药物浓度的相关性。 结果： 1.RNA-Seq检测到差异表达的mRNAs中上调、下调的mRNAs分别有751个、1050个；用不同剂量的阿霉素处理K562和K562/ADR细胞，IC50值分别为：0.04和11.328μM，提示K562/ADR细胞对阿霉素耐药；而雷公藤红素对K562和K562/ADR细胞增殖有抑制作用，且均表现出剂量依赖性，随着雷公藤红素浓度的增加，K562和K562/ADR细胞活力均逐渐降低，雷公藤红素对K562和K562/ADR细胞作用48h的IC50浓度分别为1.91μM、2.72μM。 2.雷公藤红素处理细胞48h后，与未经雷公藤红素处理的细胞相比，K562/ADR细胞凋亡比率明显升高；雷公藤红素抑制抗凋亡相关蛋白Bcl-2的表达，上调促凋亡相关蛋白Bax的表达。 3.雷公藤红素处理细胞48h后，与未经处理的细胞相比，雷公藤红素可诱导细胞周期阻滞。 4.不同浓度雷公藤红素与阿霉素联合处理48h后，与单独用药组相比，联合处理组K562/ADR细胞活力被明显抑制。 5.雷公藤红素抑制ABCB1表达并呈现剂量依赖性，随着雷公藤红素浓度的增加，ABCB1的mRNA水平逐渐降低。 结论： 1.雷公藤红素可通过抑制细胞活力，促进细胞凋亡，诱导细胞周期阻滞，逆转白血病耐药，从而发挥抗K562/ADR细胞白血病治疗作用。 2.雷公藤红素抗白血病作用可能与抑制ABCB1、Bcl-2，上调Bax表达，诱导白血病细胞凋亡密切相关。
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