摘要
肠道菌群作为机体的“代谢器官”，与机体的代谢关系密切，相关研究表明肠道菌群失调是高脂血症相关代谢疾病的一个促成因素，并且菌群的干预治疗能够显著降低血脂。作为临床降脂一线药物的非诺贝特，其降血脂效果显著，但是其降脂机制目前尚未完全解释清楚。肠道微生物是代谢性疾病的治疗靶点，而非诺贝特的降脂作用是否与肠道菌群相关仍然未知。 目的： 探究非诺贝特对高脂血症金黄地鼠肠道菌群的影响及与其降血脂作用的关联研究，并且为肠道微生态干预治疗高脂血症提供新靶标。 方法： 1.高脂血症金黄地鼠模型建立：选择雄性金黄地鼠，高脂饮食组喂饲D12108C高脂饲料进行造模，空白对照组喂饲标准饲料，连续喂饲10天后进行血脂生化检测，包括总胆固醇(Chol)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)，以上述血脂参数来判断造模成功情况。 2.非诺贝特对高脂血症金黄地鼠血脂及肝脏病变的改善作用：将建模成功的金黄地鼠，分为高脂血症模型组和非诺贝特干预组，每组6只(另空白对照组6只)。非诺贝特干预组继续给予高脂饮食并灌胃给予非诺贝特(50mg/kg)，高脂血症模型组继续给予高脂饮食并灌胃生理盐水，空白对照组进行给予标准饮食并灌胃生理盐水，给药体积均为16.7ml/kg，每天1次，连续4周。干预4周后，用3%戊巴比妥钠麻醉处死地鼠，收集血液、肝脏、肠道内容物用于检测，其中生化学检测血清中Chol、LDL-C、HDL-C、TG、丙谷转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)，肝脏进行组织病理学检查。 3.非诺贝特降血脂作用与肠道菌群的关联研究：将收集到的肠道内容物进行16SrRNA检测，对检测结果进行分析，找到差异菌后与血脂、肝酶水平进行相关性分析。 结果： 1.造模10天后高脂饮食组Chol、LDL-C和HDL-C明显升高，TG有明显升高趋势，提示高脂血症地鼠模型建立成功。 2.生化和病理检测结果显示，非诺贝特可以显著降低高脂血症地鼠的Chol、TG、LDL-C水平，并且显著改善其肝脏的炎症、脂肪变性，降低ALT和AST水平。 3.基于16SrRNA测序，在PCA、PCOA、NMDS分析中我们首次发现非诺贝特的干预有助于高脂血症地鼠的肠道菌群结构向空白对照组恢复，并且在UPGMA分析中也再次得到了验证。本研究首次发现非诺贝特干预后逆转降低了高脂血症地鼠的Firmicutes门、Proteobacteria门的相对丰度，逆转升高了Bacteroidetes门、Saccharibacteria门的相对丰度。非诺贝特干预后，在门、纲、目、科、属等水平分析三组间菌群相对丰度发现，Bacteroidetes门、Proteobacteria门、Saccharibacteria门、Bacteroidia纲、unidentified_Saccharibacteria纲、Bacteroidales目、unidentified_Saccharibacteria目、Bacteroidales-S24-7-group科、unidentified_Saccharibacteria科、Lachnospiraceae属、Lachnospiraceae-NK4A136属、unidentified-Ruminococcaceae属、[Eubacterium]-coprostanoligenes-group属、Candidatus_Saccharimonas属的相对丰度存在显著性差异，并且这些差异菌与血脂、肝酶水平呈显著相关。 结论： 本研究成功建立了高脂血症金黄地鼠模型，并进一步验证了非诺贝特干预可以降低高脂血症地鼠的血脂，改善肝功能；基于16SrRNA分析，首次发现非诺贝特的干预可以显著恢复高脂血症地鼠的肠道菌群，并且发现差异菌群与血脂和肝酶水平显著相关，其中Bacteroidetes门、Saccharibacteria门菌群的恢复可能是血脂水平改善的关键肠道菌群。本研究表明非诺贝特对肠道菌群的恢复在治疗高脂血症中起到重要作用，为肠道微生态干预治疗高脂血症提供了科学依据。
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