摘要
目的： 通过建立小鼠慢性根尖周炎模型，研究PI3K、AKT在小鼠慢性根尖周炎中的表达情况，为进一步研究PI3K、AKT在慢性根尖周炎中的作用及根尖周病治疗提供参考依据。 方法： 选取25只6周龄健康野生型C57BL/6L雌性小鼠，随机分为4个实验组和1个对照组，每组5只。实验组采用对小鼠双侧下颌第一磨牙开髓，使髓腔直接暴露在口腔中的方法，建立小鼠根尖周炎动物模型。分别在开髓术后1、2、3、4周，处死动物后取双侧下颌骨。对照组为健康小鼠下颌骨。对组织进行固定、脱钙、包埋然后制作冰冻切片，采用HE染色的方法，观察小鼠根尖周围组织的炎症情况；采用TRAP染色方法，观察根尖周围组织炎症区域中破骨细胞的表达情况；采用免疫组织化学染色方法，观察PI3K、AKT的表达和分布情况，分析PI3K、AKT、破骨细胞之间表达的相关性。 结果： 1.HE染色结果显示，健康对照组的根尖周围组织牙周膜宽度未见变化，仅见极少炎性细胞；开髓术后1周，根尖周组织牙周膜有少量增宽，有小范围的中性粒细胞浸润；开髓术后2周，牙周膜宽度明显增大，根尖周围组织可见大量的中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润，出现了明显牙槽骨吸收；开髓术后3、4周，炎症范围继续扩大，主要为淋巴细胞浸润，牙槽骨的吸收范围更加明显，牙周膜宽度继续增宽，根尖周炎动物模型建立成功。 2.TRAP染色结果显示，健康对照组根尖周组织中仅见个别多核破骨细胞；开髓术后1周，根尖周组织见少量破骨细胞；开髓术后2周，破骨细胞数目增多；开髓术后3周，破骨细胞数目更多；开髓术后4周，破骨细胞数目有所减少。破骨细胞数目比较，2和3周之间无统计学差异，1和4周之间无统计学差异（P＞0.05）。其余各组之间均有统计学差异（P＜0.05）。 3.免疫组织化学染色结果显示，PI3K、AKT的阳性细胞为深褐色，且PI3K、AKT的表达呈一定的时间规律。健康对照组的根尖周组织中仅见到少量PI3K、AKT的阳性细胞；开髓术后1周，阳性细胞增多；开髓术后2周时达到峰值；3周时阳性细胞数目减少；4周时阳性细胞数更少。实验组的阳性细胞数均大于健康对照组，主要位于中性粒细胞中，表达在细胞质里。PI3K、AKT统计学结果均为1周和4周之间无统计学意义（P＞0.05），其余各组间均具有统计学意义（P＜0.05）。PI3K OD值与AKT OD值之间存在中度相关性（r=0.615，P＜0.001）。PI3K OD值与破骨细胞OD值之间存在高度相关性（r=0.883，P＜0.001）。AKT OD值与破骨细胞OD值之间存在高度相关性（r=0.827，P＜0.001）。 结论： 1、PI3K、AKT在慢性根尖周炎组织中表达增高。 2、PI3K、AKT参与了慢性根尖周炎的疾病过程，并与根尖周炎骨破坏有一定关系。
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