摘要
目的： 卵巢癌是女性常见的恶性肿瘤之一，其以发现晚、易复发、预后差为主要特征，其中上皮性卵巢癌为最常见的病理类型，肿瘤细胞减灭术辅以铀类药物为基础的化疗为晚期卵巢癌主要治疗方式，目前治疗上皮性卵巢癌的一线化疗药物为顺铀，超过80％的患者对顺铂有初始反应，但是大多数晚期患者因获得性耐药导致复发或死亡。目前卵巢癌顺铂耐药的机制尚不清楚，染色体凝缩调节因子2(RCC2)是染色体乘客复合体的重要组成部分，已有部分研究证实RCC2可能与肿瘤细胞的药物敏感性相关，本文旨在探讨RCC2与卵巢癌顺铂耐药的关系及其可能机制，丰富上皮性卵巢癌耐药机制的研究，为预防和逆转上皮性卵巢癌细胞化疗耐药提供新的理论基础及方向。 方法： 1.采取Western Blotting及qPCR方法检测RCC2在上皮性卵巢癌敏感细胞株(A2780、Skov3)以及上皮性卵巢癌耐药细胞株(Skov3/DDP、A2780/DDP)中的表达，并分析其在两组的表达差异。 2.将上皮性卵巢癌敏感细胞株及上皮性卵巢癌耐药细胞株各分为五组进行实验比较，分别为:空白组、RCC2过表达/沉默组、阴性对照组、DDP组、RCC2/si RCC2+DDP组，分别采取CCK8法、transwell实验、流式细胞术检测各组的增殖、侵袭、凋亡能力，并应用Western Blotting检测各组RalA、RalBP1的蛋白表达水平。 结果： 1.RCC2在上皮性卵巢癌顺铂敏感细胞株及耐药细胞株中存在差异表达，RCC2在上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达高于上皮性卵巢癌顺铂敏感细胞株。 2.RCC2可增强上皮性卵巢癌细胞株的增殖、侵袭能力，抑制凋亡能力及对DDP敏感性，且可能通过RalA/RalBP1信号通路调节上述功能。通过CCK8实验发现RCC2过表达显著促进了A2780和SKOV-3细胞增殖能力、降低了卵巢癌细胞株对化疗药物DDP的敏感性，反之沉默RCC2则降低了上皮性卵巢癌耐药株的增殖能力，提高了耐药株对化疗药物的敏感性;transwell实验证实了RCC2过表达可增加A2780和SKOV-3细胞的迁移能力，沉默RCC2时上皮性卵巢癌耐药株的迁移能力降低；流式细胞技术检测发现，过表达RCC2会降低上皮性卵巢癌细胞株的凋亡能力，而沉默RCC2会增强上皮性卵巢癌顺铀耐药细胞株的凋亡，表明RCC2可以抑制上皮性卵巢癌细胞株的凋亡。Western Blotting方法显示RCC2处理后各组细胞下游通路RalA、RalBP1的表达情况，发现过表达RCC2可以上调下游分子RalA、RalBP1的表达，沉默RCC2时RalA/RaIBP表达亦减少。 结论： 染色体凝缩调节因子2(RCC2)在上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞株中的表达水平高于顺铂敏感细胞株，并能促进卵巢癌细胞株的增殖、侵袭能力，抑制其凋亡能力及对顺铂(DDP)的敏感性，并可能通过上调RalA/RalBP1通路促进卵巢癌顺铀耐药的发生。
NETL