摘要
目的：本文通过抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)体外细胞学实验和动物体内实验，研究清热类中药抗RSV的效果，初步获取抗RSV活性较强候选药物，为科学防控RSV打下基础。 方法：①通过文献关联网络技术，将经方文献、验方文献、基础研究和临床研究文献，建立链接关系，形成方-药-小儿肺炎-RSV关联网络，筛选到既能入肺经，又能对RSV有杀伤力的清热类中药药物群。经筛选得到金银花、连翘、穿心莲、鱼腥草、栀子、黄芩、金荞麦7种备选清热类中药。 ②将金银花、连翘、穿心莲、鱼腥草、栀子、黄芩、金荞麦7种清热类中药，采用不同提取方法获得36个提取液，同时选取7种中药中活性最高的7个中药成分共计43个样品作为研究对象，采用细胞病变效应(CPE)和MTT法，以药物半数毒性浓度（TC50）、药物半数有效浓度(EC50)及治疗指数（TI）作为评价指标，测定43个受试样品对RSV的抑制作用，从体外实验筛选出抗RSV效果较好的连翘提取液，进行动物体内验证。 ③选用BALB/c小鼠，采用鼻腔接种法，建立RSV感染模型。给予在细胞水平上抑制RSV效果显著的连翘提取液治疗。运用血细胞常规检测、肺指数检测法及HE染色法，研究不同剂量药物提取液体内抗RSV作用。 结果：①采用计算机结合大数据技术，获得7种抗RSV感染的备选清热类中药，分别为：黄芩(清热燥湿药)、栀子（清热泻火药）、金银花、连翘、穿心莲、鱼腥草、金荞麦（清热解毒药）。 ②通过体外细胞实验验证了43个供试品RSV感染的A549有不同程度的抑制作用。计算所得各种清热类中药提取液的TI值，提取物抗RSV作用强弱程度依次为：连翘花煎煮液﹥连翘果实煎煮离心液﹥连翘叶煎煮液﹥连翘果实超声离心液﹥连翘果实超声液﹥连翘果实煎煮液﹥连翘花煎煮离心液﹥连翘果实煎煮过滤液﹥连翘叶超声液﹥连翘花超声液﹥连翘花超声离心液﹥连翘叶煎煮离心液﹥连翘叶煎煮过滤液﹥连翘果实超声过滤液﹥连翘花煎煮过滤液﹥连翘茎超声液﹥连翘叶超声过滤液﹥黄芩超声液﹥连翘花超声过滤液﹥连翘茎煎煮液﹥连翘叶超声离心液﹥鱼腥草超声液﹥鱼腥草煎煮液﹥穿心莲煎煮液﹥连翘茎煎煮离心液﹥连翘茎超声离心液﹥金银花煎煮液﹥黄芩煎煮液﹥金荞麦煎煮液﹥连翘茎煎煮过滤液﹥连翘茎超声过滤液﹥金银花超声液﹥金荞麦超声液﹥栀子超声液﹥栀子煎煮液﹥穿心莲超声液。七味清热类中药有效活性成分抗RSV作用强弱程度依次为：鱼腥草素钠﹥利巴韦林﹥连翘酯苷﹥绿原酸﹥表儿茶素﹥黄芩苷﹥栀子苷﹥穿心莲内酯。 ③通过体外实验筛选的抗RSV作用较强的连翘，进行体内实验验证。 结果表明，连翘对RSV感染的小鼠肺炎模型有较好的治疗作用，改善肺组织损伤程度。 结论：①7种清热类中药提取液及其活性成分在体外对呼吸道合胞病毒的抑制效果强弱不同，药材中连翘花煎煮液和黄芩超声液在细胞水平上抑制RSV效果较好，活性成分中鱼腥草素钠和连翘酯苷效果较好。 ②将体外抗RSV效果较好的连翘进行体内验证，结果表明连翘对感染RSV的小鼠肺炎有一定的治疗作用，为临床用药提供了重要参考。
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