摘要
研究目的： 新辅助放化疗(nCRT)后进行直肠癌全系膜切除术逐步成为目前局部进展期直肠癌(LARC)的标准治疗方法。由于肿瘤的异质性，患者对nCRT的敏感性差异巨大。部分患者反应良好，甚至达到病理完全缓解(pCR)，另一部分患者对治疗的反应较差。本研究通过回顾性研究和血清蛋白组学研究，准确、可靠地筛选出从nCRT中受益的直肠癌患者。为直肠癌患者的个体化治疗提供一定的临床参考，并为直肠癌患者放化疗敏感性分子机制的研究提供实验基础。 研究方法： 1.回顾性研究：回顾性分析2011年1月至2018年12月在解放军总医院行nCRT的162例直肠癌患者的临床资料，根据术后病理结果将患者分为pCR组和非pCR组，寻找对直肠癌nCRT后pCR具有预测意义的临床因素。 2.前瞻性研究：收集2018年6月至2019年6月在解放军总医院行nCRT的26例直肠癌患者治疗前的血清标本，根据术后病理结果将患者分为敏感组和耐受组，用高效液相色谱质谱联用（LC-MS/MS）技术进行血清蛋白质组学研究(n=13)，筛选鉴定出能够预测nCRT敏感性的蛋白标志物，用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行临床验证(n=13)。 结果： 1.回顾性研究：经nCRT后达到pCR的患者共28例(17.3%，28/162)。单因素分析显示，肿瘤占肠腔比例≤1/2（P=0.006）、较早的临床T分期（P=0.013）、较早的临床N分期（P=0.009）、nCRT结束至手术的时间间隔＞49天（P=0.006）、肿瘤最大直径≤5cm（P=0.019）的患者更容易获得pCR，差异均有统计学意义。多因素分析显示，肿瘤占肠腔比例（P=0.01）、肿瘤最大直径（P=0.035）、nCRT结束至手术的时间间隔（P=0.009）是预测nCRT后pCR的独立因素。 2.前瞻性研究：LC-MS/MS共鉴定到371个血清蛋白质，72个蛋白标志物在敏感组和耐受组间存在明显差异（|差异倍数|＞1.5,P＜0.05），耐受组中33个蛋白表达上调，39个蛋白表达下调。基于质谱结果，选择五种蛋白：纤连蛋白1（FN1）、组氨酸富集蛋白Ⅱ（HRG）、α胰蛋白酶抑制剂重链家族成员4(ITIH4)、桥粒蛋白(DSP)、原钙粘蛋白18（PCDH18）进行ELISA验证。结果表明，FN1在耐受组的表达明显高于敏感组（P=0.03），预测nCRT敏感性的灵敏度为85.7%，特异度为83.3%，阳性预测值83.3%，阴性预测值71.4%，ROC曲线下面积（AUC）为0.69。 结论： 1.回顾性研究：肿瘤占肠腔比例、肿瘤最大直径、nCRT结束至手术的时间间隔可以预测直肠癌nCRT后pCR。 2.前瞻性研究：nCRT敏感组和耐受组间的血清蛋白质组学有明显差异；FN1在预测直肠癌患者对nCRT的敏感性方面有一定潜力，高FN1水平可能提示患者对nCRT敏感性较差。
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