摘要
强壮硬毛藻(Chaetomorpha valida)生长繁殖速度快、不易被摄食、破坏生态环境,打捞丢弃是目前控制该藻生物量行之有效的处理方法,但却造成生物资源的浪费和环境污染。本实验探究强壮硬毛藻内多糖的提取工艺、理化性质及其他活性,对其资源开发利用具有重要意义。本文首先采用单因素及正交试验优化强壮硬毛藻多糖的提取工艺;然后,使用DEAE-52阴离子交换柱层析法分离纯化得到不同的多糖组分,利用比色法测定各个强壮硬毛藻多糖级分的糖含量、硫酸基含量和糖醛酸含量,利用GS-MS、液相色谱分析等手段对强壮硬毛藻多糖级分的单糖组成以及分子量大小进行分析;最后,采用化学法研究了其抗氧化、抗凝血、抗菌、免疫调节、吸湿保湿、吸附重金属离子等活性。主要结果如下: (1)强壮硬毛藻多糖的提取工艺为料水比1:350,时间160min,pH值7,粗多糖得率为5.91%。 (2)通过强壮硬毛藻多糖的分级制备得到6个多糖级分(CVP1、CVP2、CVP3、CVP4、CVP5、CVP6)。纯化后的多糖组分的总糖含量、硫酸基含量均增加,糖醛酸含量降低;强壮硬毛藻多糖各组分平均分子量分别为4.8×105Da,7.1×105Da,6.9×105Da,5.4×105Da,6.1×105Da,4.1×105Da;强壮硬毛藻多糖各组分单糖组成以DL-阿拉伯糖,D-甘露糖或D-塔罗糖为主;甘露糖存在于CVP1、CVP2、CVP5中;塔罗糖则是存在于CVP3、CVP4、CVP6中。 (3)体外抗氧化活性最高的组分为CVP5、CVP6;强壮硬毛藻多糖可通过内源性凝血途径来影响血液凝固时间,不能通过外源性凝血途径来影响血液凝固时间;多糖对大肠杆菌起到了有效的抑制作用,CVP1的浓度达到10mg/mL时效果最为明显,使得菌体浓度由110.11mg/mL下降到85.42mg/mL对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌起到了促进生长的作用;各组分多糖对免疫细胞的增殖以及吞噬活性没有影响,但可以促进免疫细胞释放NO的量从而提高机体免疫活性;各组分多糖均有较好的吸湿效果,且43%湿度下的吸湿率普遍高于81%湿度下,各组分多糖的保湿活性普遍高于对照组;强壮硬毛藻粗多糖(CVP)对金属离子具有较好的吸附活性,吸附量大小依次为铅?铬?铜,在多糖投加量160mg时,对铅的最大平衡吸附量为55.31mg/mL。