摘要
研究背景和意义: 肝癌是我国高发的恶性肿瘤，肝癌的死亡率居高不下，绝大部分原因是由于肝癌恶性程度高，容易出现复发和转移。严峻的形势给我国医疗带来极重的负担。手术切除，介入化疗栓塞、肝内射频消融等微创手术等治疗效果并不理想。近年来，随着分子靶向药治疗作为一种新的治疗手段越来越广范应用于临床，对于分子靶向药物的关注，也日渐增长。如果能找到肝癌发生和转移的新靶点，以作为新的药物治疗靶标，那么，这个新靶点就具有非常重要的意义。我们发现一个胚胎发育相关的基因ECD能够促进肝癌的发生发展和转移，意味着ECD作为一个新的癌基因在本论文中被发现，因此，本论文着重研究ECD在肝癌中的功能及其临床意义，并初步探讨ECD参与调控的分子机制，希望为肝癌的靶向治疗提供线索。 方法与结果: 1.通过免疫组化技术及SPSS统计学分析ECD蛋白与患者临床预后的关系，发现ECD蛋白在肝癌组织中表达上调且与肝癌患者预后差相关。 2.通过使用WesternBlotting、增殖实验、克隆形成实验、Transwell小室等方法，我们检测了过表达ECD及沉默ECD对肝癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭能力的影响。证实过表达ECD可促进肝癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭与EMT。沉默ECD可抑制肝癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭与EMT。 3.采用免疫共沉淀实验，证实ECD蛋白与hnRNPK蛋白之间存在相互作用。 4.通过使用WesternBlotting、增殖实验、克隆形成实验、Transwell小室等方法证实hnRNPK具有与ECD相似的作用，能够增强肝癌细胞的增殖、克隆形成、迁移侵袭能力。 5.通过ECD与K蛋白的组合实验，证实干扰hnRNPK可抑制过表达ECD诱导的肝癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭能力的增强。 结论： 1.ECD蛋白在肝癌组织中表达上调，高表达的ECD蛋白提示患者预后不良。 2.体外实验证实了ECD的生物学功能，ECD能够促进肝癌细胞的生长、克隆形成、侵袭迁移与EMT。 3.ECD通过调控hnRNPK的蛋白表达水平，促使肝癌细胞的增殖、克隆形成和侵袭转移。
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