摘要
目的：前列腺癌现已成为全球范围内男性第二大致死性肿瘤。大量的研究结果表明，P62蛋白的异常过表达存在于多种恶性肿瘤中，但P62调控前列腺癌发展的机制尚未明确。本研究的目的是阐明P62是否通过Keap1-Nrf2抗氧化轴促进前列腺癌增殖、凋亡抵抗和侵袭。 研究方法：采用免疫组织化学、Westernblotting和免疫荧光测定P62、Keap1和Nrf2基因表达水平。分别采用RTCA系统和流式细胞仪检测评估前列腺癌细胞增殖、侵袭和凋亡能力。利用CellROXOrange试剂对活性氧自由基(ROS)进行检测,qRT-PCR检测Nrf2靶基因的mRNA水平，通过Westernblotting验证Nrf2的降解途径以及Keap1与Nrf2的关系。 结果：免疫组化显示在PCa组织中，P62和Nrf2蛋白表达水平明显高于正常对照组，Keap1蛋白表达水平则相反。Westernblotting和免疫荧光显示P62在前列腺癌细胞和组织中通过抑制Keap1途径激活Nrf2，且P62过表达通过Keap1-Nrf2抗氧化系统促进前列腺癌细胞的增殖、侵袭和抗凋亡。在P62过表达的DU145细胞中,siRNA抑制Nrf2活性后前列腺癌细胞出现增殖、侵袭能力减弱和细胞凋亡增加的现象。同时P62表达水平的升高会诱导Nrf2靶向基因的转录,并降低前列腺癌细胞的ROS水平；此外我们发现Nrf2一般通过蛋白酶体系统降解，但在P62缺乏的情况下也可通过自噬溶酶体系统降解。 结论：P62通过Keap1-Nrf2通路介导低水平的ROS促进PCa的发展，在此基础上抑制Nrf2后能改善肿瘤侵袭性和抗凋亡能力。
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