冬虫夏草子实体的人工优化培养

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中文摘要：冬虫夏草(Chinese cordyceps)是特产青藏高原的名贵生物资源。本研究通过优化冬虫夏草菌(Ophiocordyceps sinensis)子实体人工培养条件，提高子实体产量，为冬虫夏草子实体产业化培养奠定基础。本论文利用无菌水、硅胶、矿物油、甘油优化保存冬虫夏草菌；测定于大米小麦培养基中分别加入葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，三种浓度(1mg/L、10mg/L、100mg/L)的10种植物生长调节剂(环磷腺苷、吲哚乙酸、6-苄氨基腺嘌呤、玉米素、α-萘乙酸、赤霉素、吲哚丁酸、2,4-二氯苯氧乙酸、三十烷醇、乙烯利)，以及不同时间加入不同浓度冬虫夏草伴生菌上清液和菌体对冬虫夏草菌子实体产量的影响；将伴生菌上清液加入冬虫夏草菌的芽生孢子中，测定其对芽生孢子出芽生长和菌丝形成的影响。四种保存方法中，硅胶保存冬虫夏草菌效果最佳。不同含糖培养基中冬虫夏草子实体产量差异显著，葡萄糖培养基中冬虫夏草子实体干重是麦芽糖培养基中的7.6倍，出现菌丝和收获子实体的时间也比麦芽糖培养基中至少快2个月；蔗糖培养基中未获得子实体。不同种类和浓度植物生长调节剂对冬虫夏草子实体产量影响显著。于菌液中加入环磷腺苷、三十烷醇和玉米素的培养瓶均未发现菌丝生长；转入4℃培养6个月后，加入100μg/mL6-苄氨基腺嘌呤的培养瓶可见菌丝生长，但未见原基分化。与对照相比，加入100μg/mL吲哚乙酸、1μg/mL和100μg/mL吲哚丁酸、10μg/mL赤霉素、1μg/mL和10μg/mL乙烯利，以及1μg/mL2,4-D的培养瓶中子实体干重均显著提高，其中加入1μg/mL吲哚丁酸和1μg/mL2,4-D的培养瓶的子实体干重是对照的15倍。三种伴生菌(莓实假单胞菌(Pseudomonasberry)、荧光假单胞菌(P.fluorescens)和弗氏假丝酵母(Candida friedrichii))显著影响冬虫夏草子实体的人工培养；莓实假单胞菌菌体或上清液均抑制冬虫夏草菌菌丝生长；荧光假单胞菌稀释10倍和0倍上清液均能显著促进子实体的生长，子实体干重分别是对照的1.7倍和2.8倍；加入稀释10倍的弗氏假丝酵母上清液和菌体原液的培养瓶中，冬虫夏草子实体干重分别是对照组的3.9倍和3.5倍。于PM培养基中加入稀释104倍的沙雷菌(未定名)和黑曲霉上清液时，对浓度为105的冬虫夏草菌芽生孢子的出芽生长产生促进作用，出芽率约是对照的4倍和10倍；稀释102倍的黄曲霉和黑曲霉上清液对冬虫夏草菌的菌丝生长具有抑制作用。本研究发现硅胶保存法对冬虫夏草菌种具有良好保存效果；吲哚乙酸、吲哚丁酸、2,4-二氯苯氧乙酸对冬虫夏草子实体人工培养具有促进作用；荧光假单胞菌、弗氏假丝酵母的上清液和菌体显著提高冬虫夏草子实体的产量；莓实假单胞菌对冬虫夏草子实体的生长呈现抑制作用。沙雷菌(未定名)和黑曲霉上清液促进冬虫夏草菌芽生孢子出芽生长；黄曲霉和黑曲霉上清液抑制冬虫夏草菌芽生孢子形成菌丝。本论文结果为优化冬虫夏草子实体人工培养提供了科学依据。

作者：

陶海平

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关键词：

冬虫夏草子实体人工培养菌种保存植物生长调节剂伴生菌

授予学位：

硕士

学科专业：

植物保护

导师：

韩日畴、田明义

学位年度：

2020

学位授予单位：

华南农业大学

语种：

中文

中图分类号：