摘要
背景:宫颈癌是一种常见妇科恶性肿瘤，研究发现高危型HPV持续感染，特别是16、18型持续感染与宫颈癌前病变及宫颈癌的发生密切相关。HPV入侵后经过DNA整合及表达，诱导E6/E7癌基因与抑癌基因p53和pRb结合，导致抑癌蛋白失活，破坏细胞的正常生长周期，促进细胞永生化最终导致癌变。目前HPV感染治疗手段有限，研究新的抗HPV药物迫在眉睫。紫草多糖是传统中药紫草的水溶性成分，目前已有研究表明紫草多糖具有抗低危型人乳头瘤病毒、疱疹病毒，同时对多种肿瘤如小鼠宫颈癌U14实体瘤、5180腹水瘤、人胃癌细胞(SGC-7901)等有明显的抑制作用。而紫草多糖对人宫颈癌Hela细胞是否有作用及其可能的机制，目前国内外研究报道较少。 目的:以紫草多糖为研究目标，研究紫草多糖对宫颈癌Hela细胞的药理作用，并通过检测紫草多糖作用后细胞的增殖、周期、凋亡、HPV18E6、E7基因mRNA的表达情况，不仅为紫草多糖抗肿瘤提供新的证据，而且也为HPV感染的治疗及宫颈癌的预防提供新的选择。 方法:体外培养宫颈癌Hela细胞株(含高危型HPV18),将其分为实验组和对照组，实验组分别加入含有5、10、20、40、60、80umol/L的紫草多糖培养液，对照组加入不含紫草多糖的培养液。用CCK8法检测不同浓度的紫草多糖对宫颈癌Hela细胞增殖的作用，AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测紫草多糖对Hela细胞凋亡的影响，PI单染法检测Hela细胞周期。采用实时荧光定量PCR法检测HPV18E6/E7mRNA的表达水平。 结果:紫草多糖能够抑制宫颈癌Hela细胞生长，在同一作用时间，随着紫草多糖药物浓度的递增，抑制作用越发明显，在同一药物浓度，随着紫草多糖作用时间的延长，其对细胞的抑制作用增强，呈时间和剂量依赖性(P＜0.05)；紫草多糖可诱导宫颈癌Hela细胞凋亡，随着药物浓度的增加，诱导细胞凋亡作用越强，呈浓度依赖性(P＜0.05)，且PI单染法检测发现Hela细胞被阻滞于S期和G2/M期(P＜0.05)；同时紫草多糖处理可明显下调E6/E7mRNA的表达(P＜0.05)。 结论:紫草多糖体外可抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖，诱导Hela细胞凋亡，其作用机制与抑制HPV18E6/E7mRNA的表达有关。
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