摘要
目前，国内国外，对猪、牛、羊和禽的运输应激研究相对较多，国内对马运输应激引起急性期蛋白变化的研究鲜有报道，本试验研究运输应激对马体温、血常规指标、主要急性期蛋白、细胞因子以及热休克蛋白的影响，其次为便于马等大动物疾病的给药，自制两剂中药复方颗粒，最后为自制颗粒剂可供马场应用及投入生产，对自制颗粒剂进行质量检测及小鼠安全性评估。 选择12月龄、体重相近的4匹汉诺威杂交F1代马匹进行长达15h的运输试验，全程约787km，分别测定马运输前1h、运输中7h，运输后1h、9h的体温和血液指标，使用RT-qPCR方法检测马外周血淋巴细胞中HP、TNF-α、IFN-γmRNA的表达水平，ELISA方法检测马血清中SAA、HP、CRP和HSP70、HSP90的含量，其次用湿法制粒法自制两剂中药复方颗粒，最后为自制颗粒剂可供马场应用及投入生产，按照《中国药典》进行相关指标质量检测，进行最大给药量为10000mg/kg的小鼠安全性评估。研究结果如下： 在运输应激对马HP、TNF-α、IFN-γmRNA表达的影响试验中，与运输前1h相比，运输中7h、运输后9h时马体温显著增高(P＜0.05)，运输后1h的体温极显著增高(P＜0.01)，运输后9hMCV显著降低(P＜0.05)，其他指标无明显差异；马外周血淋巴细胞中HP、TNF-α、IFN-γmRNA的表达量均呈上升趋势，与运输前1h相比，运输后1h淋巴细胞中HP与IFN-γ的mRNA表达量极其显著升高(P＜0.001)，运输后9h淋巴细胞中TNF-α的mRNA表达量极其显著升高(P＜0.001)；在运输应激对马血清中APPs和HSPs的影响试验中，马血清中HSP90含量呈上升趋势，与运输前1h对比，运输中7h血清中HSP90含量显著升高(P＜0.05)，其他指标无明显差异。在缓解马运输应激颗粒剂的制备及安全性评估中，自制颗粒剂筛选出辅料与浸膏最佳比例为1∶1∶3.5(浸膏∶糊精∶蔗糖)，相关指标质量检测均符合《中国药典》2015版规定，根据WHO规定，本试验LD50在5000~15000mg/kg之间，小鼠未出现死亡现象，血常规、脏器指数、病理切片未出现明显异常情况。 研究结果表明，运输应激会使马体温升高、血MCV指标下降、外周血淋巴细胞中HP、TNF-α、IFN-γ的mRNA表达量升高、马血清中HSP90含量升高，自制颗粒剂质量检测均符合《中国药典》2015版规定，根据WHO规定为实际无毒药物，安全可控。
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