摘要
牛呼吸道疾病综合征（Bovine respiratory disease complex，BRDC）是由动物机体、病原体和环境等多因素协同作用而引起的牛呼吸道疾病(BRD)的统称，是对全球养牛业危害最严重的疫病之一。BRD可引起牛发热、呼吸急促和不同程度的咳嗽等症状，导致犊牛生长发育迟缓、泌乳奶牛产奶量下降、妊娠母牛流产和公牛精子质量下降等。通常认为病毒是BRD的原发病原，之后并发或继发细菌等病原的感染。本研究采用ELISA与PCR或RT-PCR方法对来自宁夏四个地区的送检样本进行牛呼吸道疾病常见病原感染情况检测，并对其地方流行毒株的相关基因进行测序和遗传进化分析。具体研究结果如下: 1.应用间接ELISA方法对151份临床出现呼吸道症状的病牛血清中的牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)、牛副流感病毒3型（BPIV-3）和牛支原体(M.bovis)抗体进行检测。结果显示，三种病原的抗体阳性率分别为75.5％、82.8％和70.2％。其中BRSV和M.bovis在吴忠地区的阳性率最高，分别为83.3％和80.3％;BPIV-3在中卫地区的阳性率最高，为100％。BRSV和M.bovis在冬季阳性率较高;而BPIV-3在秋季最高。三种病原的抗体总体混合阳性率为84.1％，双重混合阳性率为35.1％，三重混合阳性率为49.0％。 2.采用PCR或RT-PCR方法对191份临床发病牛的鼻腔深部拭子进行BRSV、BPIV-3、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和M.bovis的核酸检测。结果显示，四种病原的总体阳性率分别为61.8％、32.5％、46.6％和24.6％。BRSV在石嘴山地区感染率最高，为69.0％;BVDV在吴忠地区的感染率最高，为35.0％;BPIV-3和M.bovis在中卫地区感染率最高，分别为58.1％和48.4％。BRSV、BVDV和M.bovis在冬季易发，而BPIV-3在秋季多发。四种病原总体混合阳性率为52.8％，双重混合阳性率为34.0％，三重混合阳性率为15.7％，四重混合阳性率为3.1％。 3.基因序列测定和遗传进化分析显示，6株BRSV样本株的N基因序列均与美国的A51908株亲缘关系最近。8株BVDV样本株的5'-UTR基因序列均与BVDV-1型参考株的亲缘关系最近，属于BVDV-1型。根据BPIV-3的基因分型方法，6株BPIV-3样本株均属于BPIV-3aa型。7株牛支原体样本株的oppD/F基因序列与中国的地方分离株聚类在同一小分支，亲缘关系较近，而与无乳支原体参考株PG2和5632的亲缘关系较远。 综上所述，本研究结果揭示了宁夏部分地区的牛群中BRSV、BPIV-3、BVDV和M.bovis这四种病原的分布及感染情况，并且明确了其地方流行株与国内外参考株之间的亲缘关系及变异情况，为宁夏综合防控牛呼吸道疾病提供了参考依据，也为进一步研发更有效的疫苗提供了数据支撑。
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