摘要
无花果是一种果实甜美可口，外观也具有较高观赏性的高产量植物，通过现代医学研究表明无花果叶具有很多生理活性主要包括抗氧化，抗菌，抗骨质疏松等。本文以无花果叶为原料，对其中的主要多酚类及香豆素类物质进行了高效提取与富集，同时对提取物的抗氧化及抗虫活性均进行了简单的评价，为综合利用开发无花果植物资源最大化提供了丰富的理论基础与实验技术支持。 本文利用高效液相色谱建立了迅速高效，简单易行的无花果叶中六种目标化合物的分析检测方法，并通过新型天然复配型表面活性剂对无花果叶进行微波辅助提取，同时利用浊点分离法对有效物质进行了富集，并在多次循环下，评估了表面活性剂的回收利用性能，最后对天然表面活性剂辅助提取获得的无花果叶的粗提物进行了初步的功能评价。 本研究的主要取得的结果包括以下三个部分: 1.建立了HPLC同时分析检测无花果叶中六种主要多酚类以及香豆素类成分即绿原酸、咖啡酰基苹果酸、补骨脂苷、芦丁、补骨脂素以及佛手柑内酯的方法 HPLC条件:C18色谱柱（5μm，250mm×4.6mm，i.d.），紫外检测器，检测波长为254nm，进样量:5μL，柱温:30℃，流动相:乙腈:0.15％的甲酸水溶液(v/v),梯度洗脱:0min(13∶87)-13min(16∶84)-25min(17∶83)-55min(65∶35)，流速为1mL/min。方法学验证表明，在检测范围内，六种目标成分拥有较好的线性关系，且重复性、精密度、稳定性以及加样回收率均表现良好。本实验按照上述检测条件对无花果叶六个主要多酚以及香豆素类成分的含量进行分析测定，绿原酸、咖啡酰基苹果酸、补骨脂苷、芦丁、补骨脂素以及佛手柑内酯的含量分别为:0.49mg/g、14.32mg/g、9.20mg/g、6.81mg/g、23.66mg/g、4.96mg/g。 2.对天然复配型表面活性剂联合微波辅助提取无花果叶中的有效生物活性物质的实验条件进行了设计和工艺参数的优化，最终的结果如下: 天然复配型表面活性剂:辛奎基葡萄苷(APG)∶曲拉通100(TX100)=3∶1，0.015mg/mL 提取温度:40℃ 提取功率:400W 提取时间:10min 液固比:20∶1mL/g 溶液pH:5 在上述优化的条件下，咖啡酰基苹果酸、补骨脂苷、芦丁、补骨脂素以及佛手柑内酯的平均提取率分别为10.74mg/g、6.57mg/g、5.27mg/g、17.29mg/g和3.85mg/g，且回收率均大于70％。不同提取方法的比较表明，天然复配表面活性剂联合微波辅助提取(Surfactant-MAE)是一种绿色高效、能耗低、提取率高的提取技术，与超声辅助以及甲醇溶液提取相比，五种化合物的总量分别提高了1.23倍和1.12倍，所以更适用于植物材料中天然活性化合物的提取，应用前景广阔。为了最终能够有效地对天然复配型表面活性剂进行回收再利用，利用了浊点分离技术对表面活性剂进行富集回收，结果发现在60℃下处理10min达到平衡状态后，富集比可以达到9.48，在此最佳富集工艺条件下，咖啡酰基苹果酸、补骨脂苷、芦丁、补骨脂素以及佛手柑内酯的回收率的平均值分别为85.27％、88.24％、81.45％、86.65％以及89.27％，浓度也由富集前的0.39mg/mL、0.22mg/mL、0.18mg/mL、0.58mg/mL、0.13mg/mL，变为富集后的2.90mg/mL、1.83mg/mL、1.35mg/mL、4.73mg/mL、1.09mg/mL。且通过五次循环使用，天然复配型表面活性剂能够仍达到高于80％的回收率。 3.完成了无花果叶提取物的初步功能性评价 通过将利用天然表面活性剂辅助提取与常规水溶液提取获得的无花果粗提物进行对比，表明了天然复配表面活性剂能更好地提高无花果叶粗提物的抗氧化性及抗虫性，无花果粗提物浓度为1mg/mL、5mg/mL以及10mg/mL时，加入适当浓度的天然表面活性剂后，虫子死亡率率分别为36.85％、47.24％和56.3g％。无花果提取物抗氧化DPPH活性IC50值为0.087mg/mL，ABTS自由基清除能力IC50为0.759mmol/g。同时表面活性剂提取的花果叶提取物中有效成分的稳定性增强，在1-7天中目标物质的稳定性分别提高了3％、20％、20％以及15％，为天然产物化学用品如医疗和美容产业的开发与利用提供了十分有价值的参考。 本论文成功地配制了一种天然复配型表面活性剂，并首次联合微波辅助技术对无花果叶中的主要多酚类以及香豆素类成分进行提取，同时利用浊点分离技术进行了富集和回收利用，并对提取物的抗氧化性、抗虫性和稳定性进行了初步评价。结果表明复配表面活性剂/微波辅助提取法具有高效、绿色、环保特点，且能够重复循环使用，提取物含量高活性好。本研究为无花果叶资源利用最大化提供了丰富的数据支撑，同时此方法也会从植物原材料中获取天然产物的有效途径提供了十分具有研究价值的参考。
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