不同提取方法对血红铆钉菇多糖结构及活性的响应研究

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中文摘要：血红铆钉菇[Chroogonzphis rutilus(Schaeff.)O.K.Mill.]是一种珍贵的林下食药用菌，多糖是血红铆钉菇中的重要活性成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳、降血糖等多种药理作用。提取是研究和利用天然多糖资源的关键环节，而关于多糖提取方法及构效关系的研究却鲜有报道。因此，本文对四种提取方法提取血红铆钉菇多糖的工艺进行优化，并对四种多糖的抗氧化活性及免疫调节活性进行分析，同时研究了四种多糖的结构表征，为血红铆钉菇的开发利用提供理论依据，其研究结果如下: (1)通过单因素结合响应面试验，利用传统水提法、超声提取法、微波提取法及超声微波联合提取法对血红铆钉菇多糖提取工艺进行优化，其中超声微波联合提取法具有提取率高、提取时间短、溶剂消耗少等优点，其最佳工艺条件为:液料比29∶1mL/g、超声时间8min、微波时间6min、微波温度92℃，提取率为8.69％+0.19％。 (2)四种工艺所得多糖结构分析结果显示，血红铆钉菇多糖是一种由D-吡喃型葡萄糖、甘露糖及半乳糖组成，主要由→6)-α-D-Glcp-(1→和→4)-α-D-Glcp-(1→构成的三螺旋杂多糖，不同提取方法并未改变血红铆钉菇多糖的糖苷键、主要官能团及单糖类型，但能显著影响其单糖组成、分子量、三螺旋构象及外观形貌;四种CRP在化学组成上无显著差异，且均存在一定含量的硫酸基;在分子量方面，CRP-UM分子量最高为145kDa，而CRP-U分子量最低为121kDa;此外，四种CRP均存在三螺旋构象，且CRP-UM具有更强的形成能力。 (3)对四种提取方法所得多糖的体外抗氧化和细胞抗氧化活性进行考察，结果表明四种血红铆钉菇多糖均具有一定的抗氧化活性，其中CRP-UM具有最强的总还原力、·OH、ABTS+及·O2-自由基的清除能力，且对H2O2诱导的HL-7702细氧化损伤具有最强的缓解作用，能够显著提高细胞活力，提升其T-SOD及GSH-Px活性，降低细胞MDA含量。 (4)体外免疫调节活性比较分析结果表明，四种提取方法所得血红铆钉菇多糖均能够剂量依赖地促使RAW264.7巨噬细胞活化，促进其NO的释放、提升其细胞因子TNF-α及IL-6的分泌，提高细胞中ROS水平。与抗氧化结果不同，四种多糖中CRP-H具有最强的激活能力，其次为CRP-M和CRP-U，以CRP-UM激活能力最弱。

作者：

岳峥嵘

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关键词：

血红铆钉菇多糖提取工艺抗氧化活性免疫调节活性

授予学位：

硕士

学科专业：

森林保护学

导师：

张国财

学位年度：

2020

学位授予单位：

东北林业大学

语种：

中文

中图分类号：