摘要
目的：线粒体融合蛋白2(MFN2)定位于线粒体外膜，对恶性肿瘤细胞的迁移和侵袭至关重要。雌激素受体β(ERβ)在乳腺癌的发生发展过程中主要发挥抑癌作用，我们前期的研究结果表明ERβ可以通过诱导MFN2的表达抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭。但是，由于ERβ诱导MFN2表达抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭的机制尚不明确。因此在这项研究中，我们旨在探讨ERβ所诱导的MFN2在此过程中的作用以及所涉及的调节机制。 方法：本研究采用免疫组化法检测乳腺癌组织MFN2的表达水平，并分析其与乳腺癌患者的临床病理特征和预后的关系；采用脂质体转染法分别在人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中转染ERβ和MFN2的敲低型和表达型质粒，分别提取细胞蛋白后采用westernblot法在两种细胞中检测ERβ对MFN2表达的影响以及MFN2对p-AKT473和MMP2表达的影响；在转染MFN2敲低型质粒的细胞中使用AKT通路抑制剂LY294002，采用westernblot、免疫细胞荧光和划痕实验检测MFN2对其下游信号通路以及乳腺癌细胞迁移和侵袭行为的影响。 结果：MFN2的表达水平与乳腺癌患者的分子分型和预后生存相关(P＜0.05)，在生物学行为较差的三阴性亚型乳腺癌中的MFN2阳性表达率显著低于HER2+亚型和Luminal亚型,MFN2低表达组MFN2高表达组相比预后更差(P＜0.05)；乳腺癌患者组织中MFN2的表达水平与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、组织学分级无相关性(P＞0.05)；ERβ在人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中均可诱导MFN2的表达，MFN2的敲低使p-AKT473和MMP2升高，相反MFN2的过表达显著抑制p-AKT473和MMP2的表达；在敲低MFN2组中使用AKT通路抑制剂LY294002，westernblot结果显示，在敲低MFN2后使用AKT通路抑制剂LY294002组，p-AKT和MMP2被显著抑制，westernblot和免疫细胞荧光分析结果也表明MMP2显著降低，同时划痕实验证明在敲低MFN2后使用AKT通路抑制剂LY294002组与敲低MFN2后未使用通路抑制剂组相比细胞的迁移能力降低,即LY294002逆转了敲低MFN2基因后p-AKT473和MMP2的增加，同时使人乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力降低。 结论：MFN2与乳腺癌患者的分子分型和预后密切相关；在人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中，ERβ可以通过调控MFN2的表达来抑制AKT信号转导通路，从而抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力，进而发挥抑癌作用。
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