摘要
目的探讨锰引起的大鼠原代海马神经元损伤以及对氨基水杨酸钠(PAS-Na)的干预作用效果。材料与方法培养至第8d的海马神经元，分别(1)经0、25、50、100、200μMMnCl2单独作用24h，(2)单独给予0、0.5、5、50、100、500μMPAS-Na作用24h，用倒置相差显微镜观察神经元的形态，MTT法测定其存活率。(3)海马神经元随机分为对照组、染锰组、低、中和高PAS-Na剂量干预(L-、M-、H-PAS)组。对照组给予培养液培养48h;染锰组神经元暴露于含50μMMnCl2培养液24h后，培养液培养24h;L-、M-、H-PAS组神经元暴露于含50μMMnCl2培养液24h后，分别给予含PAS-Na50、500、5000μM的培养液作用24h。然后，用倒置相差显微镜观察神经元形态，噻唑蓝(MTT)法测定其存活率，AnnexinV-FITC细胞凋亡试剂盒检测其凋亡率，Rhodarnine123检测神经元线粒体平均荧光强度,SCGE法检测神经元的DNA损伤程度。结果(1)锰可引起海马神经元的形态损伤及存活率呈剂量-反应性下降。(2)PAS-Na对海马神经元形态无明显影响，且各PAS-Na剂量组的存活率对照组无差异。(3)染锰组神经元皱缩、突起稀少。与染锰组相比，L-、M-PAS干预组神经元胞体皱缩均与其相似，H-PAS干预组较强;L-、M-PAS干预组的神经元突起较多，但H-PAS干预组较稀疏。染锰组神经元存活率明显低于对照组，但其凋亡率和线粒体平均荧光强度高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。L-、M-、H-PAS干预组与染锰组上述指标比较，差异尚无统计学意义(P＞0.05)。 与对照组相比，染锰组彗星头部荧光强度较低，尾部DNA百分率、Olive尾距均较高(P＜0.05)。与染锰组相比，L-、M-和H-PAS干预组彗星头部荧光强度相似，但其尾部DNA百分率、Olive尾距均降低(P＜0.05)。结论体外染锰对大鼠原代海马神经元损伤明显，0.5-500μMPAS-Na对神经元的形态和存活率无有害作用，50-5000μMPAS-Na对锰致海马神经元DNA损伤有干预作用。
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