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广西医科大学在校大学生人芽囊原虫感染情况调查与65例B.h分离株的基因型初步研究

刘腾

广西医科大学在校大学生人芽囊原虫感染情况调查与65例B.h分离株的基因型初步研究

刘腾1
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  • 1. 广西医科大学
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摘要

目的:了解在校大学生群体人芽囊原虫(Blastocystis hominis)的感染情况;进一步探明广西B.h的基因型构成,为B.h分类学研究提供科学依据。 方法:采用随机抽样法选择广西医科大学在校大学生作为流行病学调查对象,采用酸醚离心沉淀法进行粪便检查,光镜下形态鉴定,定性诊断。从B.h感染者粪便中分离虫体,经体外培养后抽提基因组DNA。应用国际通用的STS引物进行PCR扩增基因分型;自行设计elf-1α保守区片段PCR引物,对广西已发现的未知基因型虫株进行DNA序列分析和同源性比较,应用MEGA法构建系统发牛树。 结果:广西医科大学在校大学生B.h的平均感染率为14.93%:汉族感染率13.48%,壮族18.38%,其他民族感染率为17.24%;符年级感染率最低为13.19%,最高达16.28%;男性感染率为14.74%,女性感染率为15.06%;广西本省感染率15.06%,外地生源感染率为13.94%。 以7对STS引物对53个样本的基因组DNA进行PCR扩增,共发现5种已知基因型(1、3、4、6、7型)虫株;其中,单纯1型有4株,占7.55%(4/53);单纯3型17株,占全部人源性分离株的32.08%(17/53);单纯的4型有4株,占7.05%(4/53);单纯6型有1株,占1.89%(1/53);单纯7型有5株,占9.43%(5/53);22株无特异性区带出现,初步认为是未知基因型;进一步应用elf-lα保守区引物对23株未知基因型融B.h(11株来自广西医科大学在校人学生感染者、12株来自南沿海地区分离株)进行PCR扩增分析,结果有15株显示特征性片断,8株显示阴性。成功进行了13株elf-1α保守区DNA测序和同源性比较分析,发现这13未知基因型B.h与已报道的S株系同源性达70%左右。系统发生树构建结果发现,13株未知基因型中至少存在3种以上不同类群。 结论:(1)广西医科大学在校大学生B.h感染率较高,并且存在校内感染的可能性;壮族学生B.h感染率高于汉族。(2)发现基因1型、3型、4型、6型、7型等5种已知基因型虫株,以3型为主;其中7型系我国首次在广西发现。(3)广西存在未知基因型B.h,初步发现与S株系近缘,而且存在不同类群。(4)elf-1α可作为B.h分类的另一项分类依据,我们独立设计的elf-1α保守区PCR引物能揭示未知基因型B.h之间的遗传差异,在B.h的分类学中有应用价值。

关键词

人芽囊原虫/感染情况/大学生/B.h分离株/基因型

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授予学位

硕士

学科专业

病原生物学

导师

石焕焕

学位年度

2012

学位授予单位

广西医科大学

语种

中文

中图分类号

R1
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