摘要
目的:通过建立肝纤维化动物模型，研究老鼠簕生物碱A(4-羟基苯并恶唑-2-酮，4-hydroxy-2-benzoxazolone，简称HBOA)及其乙酰化物对猪血清(PS)所致大鼠免疫性肝纤维化的保护作用，并围绕肝星状细胞(HSC)及相关细胞因子探讨其抗肝纤维化作用的分子生物学机制。 方法:将SD大鼠随机分成正常对照组(NC)及肝纤维化组，对肝纤维化组大鼠腹腔注射无菌PS0.5mL/只，诱导大鼠免疫性肝纤维化，而NC组大鼠腹腔注射等体积生理盐水，每周2次，连续12周。第8周末，病理确认肝纤维化模型形成后，将形成肝纤维化的大鼠随机分为模型对照组(MC)、秋水仙碱组(colchicine)、HBOA组、4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮(4-acetoxy-2(3H)-benzoxazolone，TC-2)组和3-乙酰基-4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮(3-acetyl-4-acetoxy-2-benzoxazolone，TC-3)组。各给药组灌胃给予相应的药物，而NC组和MC组灌胃给予0.6％CMC-Na溶液，1次/d，连续给药4周。在末次给药24小时后处死大鼠，采集血清和肝组织，检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性和肝组织中丙二醛(MDA)含量，Masson三色染色法染色检测胶原含量，采用RT-PCR技术检测大鼠肝组织中血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)，血小板衍生生长因子β受体(PDGFRβ)，丝裂原活化蛋白激酶3(Mapk3)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA的表达，同时采用免疫组织化学技术检测肝组织中转录生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。 结果:生化指标检测结果显示，和MC组比较，HBOA、TC-2及TC-3均能明显降低大鼠血清中ALT、AST的活性(P＜0.05或P＜0.01)，明显降低肝组织中的MDA含量(P＜0.05或P＜0.01)。Masson染色结果显示，HBOA、TC-2及TC-3均能明显减轻PS所致肝组织胶原纤维沉积(P＜0.05或P＜0.01)。RT-PCR结果显示，与MC组比较，HBOA、TC-2及TC-3均能降低大鼠肝组织中PDGF-BB、PDGFRβ及Mapk3mRNA的表达(P＜0.05或P＜0.01)，升高大鼠肝组织中PPARγmRNA的表达(P＜0.05)。而HBOA组、TC-2组和TC-3组大鼠肝组织的ERK1mRNA表达水平较MC组虽有下降，但不具统计学差异。免疫组化结果表明，和MC组比较，HBOA、TC-2及TC-3均能减少大鼠肝组织中TGF-β1和α-SMA蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01)。HBOA组、TC-2组及TC-3组大鼠血清生化指标及肝组织胶原含量及其他各指标含量的差异无统计学意义。 结论:HBOA、TC-2及TC-3对大鼠肝纤维化具有一定的保护作用，其保护肝脏抗纤维化的分子生物学机制可能与其抑制脂质过氧化、调节相关细胞因子及抑制HSC活化及增值有关。
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