摘要
阿尔兹海默症(Alzheimers disease，AD)作为一种发生在老年期及老年前期的原发性退行性神经疾病，在给病人身心带来痛苦的同时也为社会带来了巨大的压力。现有治疗AD的药物均不能彻底治愈该疾病，因此急需寻找能够有效治疗AD的药物。中药作为中华民族五千年来绚丽的瑰宝，有许多方剂具有促智、益智的功效，且中药具有多靶点的特点，因此将是寻找阿尔兹海默症有效治疗药物的重要源泉。 中药复方聪明汤出自《古今医鉴》，其配方组成为石菖蒲、远志和茯苓，具有安神定志，宁心止忘之功效，主治不善记而多忘者。本课题利用秀丽隐杆线虫和APP/PS1双转基因小鼠为模型对聪明汤的抗老年痴呆作用进行评价，并对其作用机制进行初步研究，为从中药复方中寻找有效治疗老年痴呆的药物提供指导。研究结果表明： 1.利用Aβ转基因线虫模型CL4176对聪明汤的水提部位CMT-W和乙醇提取部位CMT-E进行研究发现，5mg/mL的CMT-E具有显著延缓CL4176线虫瘫痪的作用，其半数瘫痪时间(PT50)比空白对照延长了70.30%。说明聪明汤具有治疗AD的潜力。 2.利用活性跟踪评价方式对聪明汤的最佳提取工艺进行研究，发现聪明汤组方中三味中药分别以茯苓水提部位、远志乙醇提取部位和石菖蒲乙醇提取部位三个部位混合(CMT-Mix)后在3.5mg/mL浓度下观察到更为显著的延缓CL4176线虫瘫痪作用，其半数瘫痪时间(PT50)比空白对照延长了91.55%，远高于CMT-E的延长比率。 3.利用线虫的化学趋化性和5-羟色胺敏感性的实验研究，发现CMT-Mix能显著提高线虫对化学诱导剂及5-羟色胺的敏感度，有效缓解了Aβ淀粉样蛋白对神经系统的毒性，对线虫神经系统具有保护作用。 4.Westernblot分析显示，CMT-Mix可通过抑制转温度后24h、27h的CL4176线虫体内Aβ单体的合成和促进31h的CL4176线虫体内Aβ寡聚体的降解这两方面来减少线虫体内Aβ毒性蛋白的累积。 5.氧化应激及热应激分析发现，CMT-Mix能显著提高线虫抵抗外界环境压力胁迫的能力，具有显著的抗氧化活性。 6.qPCR分析显示，CMT-Mix显著提高了CL4176线虫体内sir-2.1和pbs-5基因的转录水平，表明聪明汤抗AD作用可能需要sir-2.1和pbs-5基因的参与。 7.新物体识别，穿梭，水迷宫等行为学实验分析表明，CMT-Mix能显著提高APP/PS1双转基因模型小鼠的学习记忆能力。此外，实验动物大脑匀浆生化分析显示，给药组小鼠大脑匀浆较模型对照组的SOD含量提高，MDA含量下降，GSH含量升高。 综上所述，本课题首次通过对复方中各中药进行不同提取工艺再组合的方式，利用Aβ转基因线虫模型和APP/PS1双转基因小鼠模型对聪明汤抗老年痴呆作用进行了评价，获得延缓AD线虫瘫痪的最佳提取工艺组合，并分别利用不同的模式生物对该复方抗老年痴呆的作用机制进行了探讨，为后续进一步研究提供了一定的工作基础，上述研究也为从中药中寻找治疗老年痴呆药物提供了新的思路和指导作用。
NETL