摘要
恶性肿瘤严重威胁人类的生命和健康，是人类死亡的主要病因之一。抗肿瘤药物的研发一直是药物开发中的重要方向之一。人工合成的核苷类化合物与天然核苷化合物在结构上相似，在进入人体后可以抑制病毒或肿瘤细胞复制，实现抗病毒或抗肿瘤的目的。人们对于核苷类抗肿瘤和抗病毒药物的研发越来越重视。非环核苷类化合物是核苷类化合物中独特的一类化合物，具有独特的理化性质，已成为核苷药物研发的重点。目前非环核苷化合物是已上市的抗病毒药物中重要的一类，但是关于非环核苷类化合物的抗肿瘤活性研究却比较少。越来越多的证据显示病毒性疾病与肿瘤的发生有密切关系，对非环核苷抗肿瘤药物的创新研究不仅可以打破国际对核苷药物的垄断，而且具有重要的科学意义和潜在的应用前景。 为了研究非环核苷类化合物的抗肿瘤活性，我们在之前研究的基础上，通过Aza-Michael加成反应，烯丙基胺化反应等反应合成了80个嘌呤2位，6位，8位，9位以及嘌呤侧链的1’位带有不同取代基的非环核苷化合物以及11个具有不同构型的手性非环核苷类化合物。使用MTT法对这些化合物进行初步的抗肿瘤活性研究，分析总结构效关系。实验结果表明化合物9b在体外对结肠癌细胞系的两种细胞(HCT-116和SW480)表现出较强的抑制增殖的能力，IC50分别为0.89μM和1.15μM，对照药物5-氟尿嘧啶(5-FU)对两种细胞的IC50分别为10.81μM和9.70μM，并且S-构型的手性非环核苷类化合物比R-构型的表现出更强的抗肿瘤活性。对化合物9b进行了一系列的体内外抗肿瘤评价研究。流式细胞术实验结果表明，化合物9b主要是通过诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞增殖的。WesternBlot实验结果表明化合物9b至少是通过促进Bax，P53，Cleaved-PARP这3种凋亡相关蛋白表达以及对Bcl-xl蛋白的抑制诱导细胞凋亡的。线粒体膜电位(MMP)实验结果表明，MMP的耗散可能参与了化合物9b诱导的细胞凋亡。细胞集落实验表明化合物9b可以抑制细胞集落的形成。裸鼠移植瘤实验结果表明化合物9b在SW480细胞移植的裸鼠模型中显示出同对照药物5-FU同等效力的疗效并且毒性相较于对照药物5-FU小。对裸鼠的肿瘤进行H&E染色实验结果表明，给予化合物9b后，小鼠体内肿瘤发生明显坏死。 通过对非环核苷的体内外抗肿瘤活性评价研究，可以获得活性较好的抗肿瘤先导化合物或候选药物分子，可为手性非环核苷类药物提供合理的合成策略和方法，为开发具有自主知识产权的手性抗肿瘤非环核苷药物奠定基础。
NETL