摘要
背景及目的 原发中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)是原发结外非霍奇金淋巴瘤的一种少见类型，预后较差，发病率逐渐升高。原发眼内淋巴瘤(PIOL)是PCNSL的一种特殊类型，很容易出现中枢进展，是大多患者的死因。PCNSL及PIOL的共同点是容易复发，预后差，早期诊断困难。因此寻找高效而敏感的诊断及疾病监测指标有着重要的临床意义。前期研究发现脑脊液IL-10对于PCNSL有着重要的诊断及监测价值，但在PIOL中的价值尚不明确。游离DNA(cfDNA)，即“液体活检”，是近些年的研究热点。有研究在复发难治(R/R)PCNSL患者脑脊液中检测到cfDNA与肿瘤组织一致的突变，并且发现脑脊液cfDNA对于R/RPCNSL患者有动态监测价值。但初治PCNSL及初治PIOL患者脑脊液cfDNA突变谱不详。因此，本研究将对初治PCNSL及初治PIOL患者的脑脊液cfDNA及IL-10进行动态监测，探索其诊断及疾病监测价值。 方法 1)对初治PCNSL患者石蜡包埋的肿瘤组织及基线脑脊液cfDNA分别进行二代测序，检测其突变谱重合率。对初治PCNSL、其他中枢淋巴瘤及初治PIOL患者基线脑脊液cfDNA进行二代测序，比较不同疾病基线脑脊液cfDNA突变谱的差异。动态监测初治PCNSL患者脑脊液cfDNA的变化趋势，并与脑脊液IL-10进行比较。 2)对初治PIOL患者脑脊液IL-10动态监测，评估其动态变化与病程的关系。 3)对初治PIOL、其他眼内淋巴瘤及疑诊眼内淋巴瘤患者基线脑脊液cfDNA进行二代测序，比较不同患者的差异。动态监测初治PIOL患者脑脊液cfDNA变化趋势，评估其与脑脊液IL-10在疾病监测方面的优劣。 结果 1.脑脊液cfDNA在PCNSL中的诊断及疾病监测价值 (1)纳入2018年7月至2019年12月期间于北京协和医院诊治的初治PCNSL10例;其他中枢淋巴瘤8例，包括R/RPCNSL3例、PIOL中枢进展2例、DLBCL中枢复发1例、SCNSL1例;初治PIOL患者3例。 (2)肿瘤组织与脑脊液cfDNA突变重合率为40％;重合基因为MYD88L265P和TBFRSF14突变。 (3)7例初治PCNSL患者有基线脑脊液，其中6例患者cfNDA突变阳性，均存在≥1种突变，且部分基因突变为多点突变，包括PIM1及ETV6等。3例患者MYD88L265P阳性，变异频率3.4％-71.5％;仅1例存在CD79B突变。另外1例初治PCNSL患者脑脊液cfDNA突变阴性。 (4)初治患者基线脑脊液存在多种基因突变及较高的变异频率，而复发患者脑脊液cfDNA突变基因数及变异频率极低或者突变阴性。 (5)脑脊液cfNDA突变动态变化与病程明显相关，且敏感性优于IL-10。 (6)基线脑脊液IL-10水平与cfNDA最大变异频率之间存在正相关关系。 2.脑脊液IL-10在PIOL中的疾病监测价值 (1)15例初治PIOL患者中，13例(86.7％)基线脑脊液IL-I0升高。 (2)脑脊液IL-10治疗后下降或转阴，疾病复发时再次升高。脑脊液IL-10升高早于疾病复发/进展，其中位提前时间为99d(37～253d)。 (3)脑脊液IL-10持续转阴组、转阴后升高组、未转阴组PFS依次变差，但无统计学意义。 3.脑脊液cfDNA在PIOL中的诊断及疾病监测价值 (1)研究纳入初治PIOL患者10例，DLBCL眼部复发2例，疑诊眼内淋巴瘤1例。 (2)4例可获得基线脑脊液的初治PIOL患者中，3例MYD88L265P突变阳性，变异频率波动为21.3-62％;2例患者CD79BY196突变阳性，变异频率波动为10.3％-61.8％。而疑诊眼淋巴瘤患者突变均为阴性。 (3)脑脊液cfDNA突变转阴者持续缓解，而脑脊液cfDNA未转阴或者持续升高者出现复发。在病程监测方面，脑脊液cfDNA敏感性较IL-10略低。 结论 脑脊液cfDNA在一定程度可以反应肿瘤组织的基因信息，对PIOL及PCNSL可能有潜在的诊断价值。脑脊液IL-10及cfDNA变化趋势与病程明显相关，甚至可早于影像学预测复发/进展，对于PCNSL及PIOL均有重要的疾病监测价值。
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