摘要
草莓果实风味独特、营养丰富,素有“水果皇后”的美称,尤其富含抗坏血酸,可以清除人体自由基从而延缓机体衰老,具有极高的营养价值和经济价值。普通栽培草莓(Fragaria×ananassa)是八倍体,二倍体森林草莓(Fragaria vesca)与八倍体草莓相比,具有生长周期短、种子产量高、转化体系成熟、基因组小且已完成测序等优势;并且森林草莓果实较软,香味浓郁,可溶性固形物含量较高,具有极大的营养价值和经济效益。我国是草莓种植大国,草莓种植面积和总产量居于世界首位。随着我国居民生活水平的提高,人们不仅对草莓的需求量显著增加,而且草莓果实的口味及营养价值也越来越受到人们的关注。细胞分裂素具有延缓植物衰老、促进果实增大、提升果实品质等效果,在农业实践中也有广泛的应用。 本实验以“Ruegen”森林草莓为材料,从内源、外源两方面提高草莓果实内部细胞分裂素的含量,以此来探究细胞分裂素对草莓果实产量及品质的影响。实验结果如下: 1.使用200μM6-苄氨基嘌呤(6-Benzylaminopurine,6-BA)和200μM激动素(Kinetin,KT)外源处理“Ruegen”草莓,显著增加了草莓果实的单果重、单株产量、可溶性糖、可溶性蛋白、抗坏血酸、花青素、总酚和黄酮的含量,表明KT和6-BA处理对草莓果实产量和品质有促进作用,尤其KT处理使得草莓果实中可溶性糖的含量提高了近90%,可溶性蛋白的含量提高了58.8%,黄酮含量提升了75%,品质提升效果十分显著。KT处理的草莓果实内源总氨基酸含量虽无显著变化,但人体中必需的几种氨基酸:苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸的含量显著增加。 2.为了研究内源细胞分裂素是否参与调控草莓果实的品质,构建了FveIPT5过表达载体(IPT是植物细胞分裂素合成途径中的关键酶),通过农杆菌介导法将表达载体导入草莓外植体,无菌培养至生芽阶段,经GUS染色和PCR验证得到了7个阳性株系,命名为A-1-A-7。RT-qPCR结果显示,7个转基因株系的FveIPT5表达量显著增加。选择转空载体株系和A-2株系,对其内源细胞分裂素含量进行测定发现,转空载体株系的异戊烯基腺嘌呤(Isoamyl alkenyl adenine,IP)含量为11.56ng/g,而A-2株系的IP含量显著增加,浓度为132.8ng/g。FveIPT5基因的导入,导致植株体内细胞分裂素含量增加,芽生长迅速,但植株生根困难。由于草莓转化周期较长且植株难生根的原因,本实验目前暂未得到草莓果实和种子,因而无法对果实产量及品质进行鉴定与分析。 综上所述,外源喷施KT和6-BA对草莓果实产量和品质有一定的提升作用,而内源细胞分裂素含量的提高对草莓果实产量和品质的影响还有待深入研究。