摘要
胆汁酸(Bile acid,BA)主要由肝脏合成并储存于胆囊,是胆汁的主要成分。胆汁酸与其受体结合参与机体糖脂稳态的调节。胆汁酸可以激活法尼醇X受体(Farnesoid X-activated receptor,FXR)并参与调节胆汁酸的合成、降低甘油三酯和胆固醇的合成以及调节糖代谢过程,胆汁酸还可以激活G蛋白偶联胆汁酸受体(Takeda G-protein-coupled receptor 5,TGR5)来参与脂肪组织和骨骼肌中的能量稳态调节。在生猪养殖过程中,胆汁酸多被用于断奶仔猪,以提高采食量、日增重以及改善肠道功能,然而在母猪日粮中添加胆汁酸对子代肌肉有何影响尚不清楚。因此,本实验通过在母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸,研究其对断奶仔猪背最长肌生长和肌内脂肪代谢的影响。 1母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸对断奶仔猪背最长肌肌纤维生长的影响 本实验选取30头妊娠90天的长×大母猪,随机分为两组,对照组饲喂正常日粮,胆汁酸组在正常日粮中添加100mg/kg的胆汁酸,实验于母猪哺乳第21天结束,仔猪称重,每窝仔猪中选雄性仔猪各1头,屠宰采样,采集仔猪血清和背最长肌。检测仔猪背最长肌中的核酸、蛋白质含量以及初乳和断奶仔猪血清中的氨基酸水平,结果显示:母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸极显著增加了仔猪平均断奶体重(P<0.01),并显著增加仔猪背最长肌中蛋白质含量(P<0.05);此外,采用放射免疫分析法检测了血清中与生长和应激相关的激素含量,结果表明:母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸显著降低了断奶仔猪血清中皮质醇水平(P<0.05)。 采用荧光实时定量PCR和Westernblot技术检测断奶仔猪背最长肌肌肉蛋白质合成、分解和肌纤维分型相关基因和蛋白质的表达水平,结果显示:母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸显著降低糖皮质激素受体的蛋白表达量(P<0.01),且自噬相关基因7的蛋白表达有降低趋势(P<0.1),另外,显著升高了肌纤维分型相关基因肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,MyHC)Ⅱx的基因表达(P<0.05),并显著降低了MyHCⅠ的蛋白表达(P<0.05)。以上结果提示:母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加100mg/kg胆汁酸促进断奶仔猪背最长肌蛋白质的沉积。 2母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸对断奶仔猪背最长肌肌内脂肪代谢的影响 母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸显著降低断奶仔猪背最长肌中的甘油三酯含量(P<0.05),与油红染色结果相一致;利用气相色谱法检测背最长肌脂肪酸的组成,结果表明:母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸显著升高了断奶仔猪肌肉中C22∶0(P<0.05),C20∶3n-3(P<0.05)和C22∶2(P<0.05)的含量,但显著降低了C20∶3n-6(P<0.05)的含量,且总多不饱和脂肪酸(P<0.1)有上升趋势。此外,母猪妊娠后期和哺乳期添加胆汁酸对母猪初乳、血清和断奶仔猪血清中的胆汁酸含量无显著影响,而胆汁酸受体FXR的蛋白表达水平有下降的趋势(P<0.1)。最后,采用RT-PCR和Westernblot技术检测了脂肪合成、脂分解、脂肪酸β氧化和线粒体功能相关基因和蛋白的表达水平,结果显示:母猪妊娠后期和哺乳期日粮添加胆汁酸显著降低了断奶仔猪背最长肌脂肪合成相关蛋白长链脂酰CoA合成酶1(P<0.05)和过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α(P<0.05)的蛋白表达,而丝裂原活化蛋白激酶(P<0.1)的蛋白表达有上升趋势,对脂分解和脂肪酸β氧化相关基因和蛋白的表达无显著影响。以上结果提示:母体妊娠后期及哺乳期日粮添加100mg/kg胆汁酸显著降低断奶仔猪背最长肌中肌内脂肪的沉积。