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美国进境苜蓿草截获滑刃线虫的种类鉴定及其生物学研究

王珍

美国进境苜蓿草截获滑刃线虫的种类鉴定及其生物学研究

王珍1
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作者信息

  • 1. 南京农业大学
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摘要

滑刃属线虫Aphelenchoides Fischer,1894(Nickle,1970)已报道种类约200种,大多数种类为食真菌线虫,少数种类为兼性植物寄生线虫,可以为害植物和食用真菌,严重时可造成巨大经济损失。本文对宁波口岸进境的美国干苜蓿草中分离到的一未知滑刃属线虫群体进行了形态学和分子生物学鉴定,同时研究了不同真菌对该线虫群体的繁殖和形态特征的影响,以及该线虫群体对不同植物的寄生性,主要研究结果如下: 1.苜蓿滑刃线虫新种的形态和分子鉴定 该美国滑刃线虫群体的主要形态特征为:雌虫体长650(518~709)μm,雄虫体长484(394~532)μm,侧区有四条侧线;口针长9.0~12.0μm;排泄孔处于神经环同一水平或稍后;雌虫阴道骨化,无阴门盖,后阴子宫囊短约6~16%肛阴距;雄虫交合刺中线长9.2~14.2μm,玫瑰刺状,基顶和喙突不发达,尾部有5个尾乳突(1+2+2);雌虫和雄虫尾端圆具尾尖突,在SEM下呈星状,分别有3和2个刺状突起。根据Shahina(1996)的分组将该美国线虫群体归为滑刃线虫属的第三组成员。基于rDNA18S、ITS和28S D2-D3区及mtCOI区序列构建的系统进化树中,该群体聚类为一单系分支,与贝西滑刃线虫和福建滑刃线虫的发育关系较近,但在形态上有明显的差异。结合形态学和分子特征鉴定,将该滑刃线虫群体描述为首蓿滑刃线虫新种Aphelenchoides medicagusn.sp.。 2.不同真茼对苜蓿滑刃线虫繁殖和形态特征的影响 测定了链格孢菌、灰葡萄孢菌(突变和野生株系)、禾谷镰刀菌(毒性和野生株系)、镰刀菌一未知种、拟盘多毛孢菌和核盘菌等6种真菌8个株系对苜蓿滑刃线虫繁殖和形态特征的影响,结果显示,线虫能取食所有菌株的菌丝体并完成生活史,但是在不同株系上繁殖的速度、数量和虫态分化均存在明显的差异;线虫在链格孢菌和拟盘多毛孢菌上的繁殖速度最快且数量最高,表明这两个菌株最适于线虫的人工培养;线虫在灰葡萄孢菌野生型株系上繁殖的雌虫数量最高,表明该菌株最利于雌虫的形成。此外,不同真菌繁殖的苜蓿滑刃线虫雌虫卵巢和后阴子宫囊长度、雄虫精巢长度和T值等均有明显变化,表明不同真菌种类可影响苜蓿滑刃线虫的生殖系统发育。 3.苜蓿滑刃线虫对不同植物的寄生性研究 测定了苜蓿滑刃线虫对菊花(金陵红太阳和金陵如烟品种)、三叶草、黑豆、黄豆和苜蓿(加拿大3010、法国三得利和中国甘农5号品种)等4种植物8个品种的寄生性,观察接种后30天内的症状发展情况,同时以贝西滑刃线虫苜蓿群体和水稻群体作为接种对照。结果显示,接种6天后贝西滑刃线虫两个群体在所有植物上均可以产生明显的为害症状,具有一定的致病性。而接种苜蓿滑刃线虫6天后发现黑豆叶片端部呈现畸形,黄豆叶片出现褐色病斑,苜蓿叶片畸形萎缩和茎秆发育不良,但在菊花和三叶草上无明显症状出现;线虫接种后的黄豆和苜蓿植株干重显著下降;线虫在黑豆、黄豆和苜蓿上的繁殖系数(Rf)均低于1,没有发现幼虫,表明苜蓿滑刃线虫对这几种植物具有弱寄生性,但它们都不是其合适寄主。此外,不同植物上繁殖的雌虫在后阴子宫囊长度上有明显的差异,除苜蓿上雌虫的受精囊形态有轻微缢缩外,其他特征并没有变化。 本文通过形态学和分子生物学鉴定将美国未知滑刃线虫群体描述为苜蓿滑刃线虫新种,不同真菌株系对该线虫的发育、繁殖和生殖系统形态有显著的影响,该线虫对黑豆、黄豆和苜蓿有弱的植物寄生性。研究结果不仅丰富了对滑刃属线虫生物学特性的了解,而且为中国口岸线虫的植物检疫提供了理论依据。

关键词

滑刃线虫/种类鉴定/形态学/分子生物学

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授予学位

硕士

学科专业

植物保护;植物病理学

导师

李红梅

学位年度

2019

学位授予单位

南京农业大学

语种

中文

中图分类号

Q95
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