摘要
本试验旨在通过体外试验确定四种家禽屠宰副产物(水解羽毛粉(HFM)、肉骨粉(MBM)、血粉(BM)和肝粉(LM))的蛋白水解酶（蛋白酶）最佳酶组合。首先，根据正交设计试验确定最佳酶组合，其次根据响应面设计试验确定酶组合的最造反应时间及添加量。通过成年公鸡的排空-强饲试验收集排泄物，测定常规养分的表观代谢率，进而评价蛋白酶组合对家禽屠宰副产物养分消化率的影响，为实际生产提供一定的参考价值。主要试验内容如下: 试验一:四种家禽屠宰副产物的最佳蛋白酶组合筛选及最适条件确定 单一蛋白酶水解条件的选择试验结果表明:单一蛋白酶制剂(夏盛碱性蛋白酶(XJ)、木瓜蛋白酶(MG)、隆大碱性蛋白酶(LD)、夏盛中性蛋白酶(XZ)和Alcalase(AL）对HFM、MBM、BM和LM的最适反应时间均为360min，最适添加量均为8000U。 蛋白酶组合的筛选通过L16(25)正交设计试验，仅考虑一级交互作用，根据干物质消失率、各阶段分子量蛋白含量、水解度和水解液适口性等指标，确定最佳酶组合。试验结果表明:HFM的最佳酶组合分别为XJ与AL组合及LD与AL组合;MBM的最佳酶组合为MG与AL组合及XZ与AL组合;BM的最佳酶组合为XZ与AL组合及MG与AL组合;LM的最佳酶组合为XZ与AL组合及MG与AL组合。 蛋白酶组合的水解参数优化通过响应面设计试验，对每种酶组合的水解条件(每种蛋白酶的添加量和反应时间(T))进行优化。试验结果表明:4g HFM底物的XJ与AL组合的最适添加量二者依次为4000U和4000U，T为360min，回归方程为:水解度(DH)=34.47-2.57×(XJ)2-2.41×(AL)2-2.54×T2，最大水解度为34.47％;LD与AL组合的最适添加量二者依次为4000U和4500U，T为360min，回归方程为:DH=45.08+1.48×T-0.51×(LD)2-0.86×(AL)2，最大水解度为45.62％。4g MBM底物的XZ与AL组合的最适添加量二者依次为4000U和4000U，T为390min，回归方程为:DH=57.85+1.08×T-0.79×T2，最大水解度为58.30％;MG与AL组合的最适添加量二者依次为3500U和4841U，T为360min，回归方程为:DH=62.25-2.03×T2，最大水解度为63.64％。4gBM底物的XZ与AL组合的最适添加量二者依次为4500U和3500U，T为360min，回归方程为:DH=39.40-2.11×T2，最大水解度为40.42％;MG与AL组合的最适添加量二者依次为4500U和4500U，T为390min，回归方程为:DH=35.27+0.64×(MG)+1.16×T+0.67×(MG)×(AL)-0.50×(AL)2，最大水解度为36.77％。4gLM底物的XZ与AL组合的最适添加量二者依次为4500U和4500U，T为360min，回归方程为:DH=28.33+0.85×T-2.43×T2，最大水解度为28.97％;MG与AL组合的最适添加量二者依次为4500U和4500U，T为390min，回归方程为:DH=23.18+1.14×(MG)+1.01×T，最大水解度为26.29％。 试验二:复合酶解家禽屠宰副产物常规养分消化性的体内评价 本试验选用三种副产物的酶解产物进行动物体内试验，收集排泄物，测定常规养分表观代谢率，并评价酶组合对三种家禽屠宰副产物养分消化的影响。 试验结果表明:①饲喂HFM酶解产物的公鸡鲜粪排出量高于未经酶组合处理组(P＞0.05)，干粪量少于未酶解的HFM组（P＞0.05），但鲜粪含水量显著高于未经酶组合处理组(P＜0.05)。强饲MBM酶解产物的公鸡鲜粪排出量和干粪量均较多，鲜粪含水量较低。强饲LM酶解产物的公鸡鲜粪排出量和干粪量较少，鲜粪含水量较低。 ②饲喂HFM酶解产物组的干物质表观代谢率低于未酶解的HFM组(P＞0.05)，而粗蛋白表观代谢率和表观代谢能均显著高于未酶解的HFM组（P＜0.05）。饲喂MBM酶解产物组的干物质表观代谢率较低，粗蛋白表观代谢率较高，表观代谢能较低。饲喂LM酶解产物组的干物质和粗蛋白表观代谢率以及表观代谢能均较高。 ③HFM酶解产物中各种氨基酸表观代谢率均有不同程度的增加，其中，必需氨基酸中Val、Thr及Cys表现代谢率显著增加(P＜0.05)，非必需氨基酸中Asp和Glu表观代谢率显著增加(P＜0.05)。肉骨粉的酶解产物中的Thr、Glu和Asp表观代谢率较高，Cys、Met、Ile和Val表观代谢率较低。LM酶解产物中的Ile、Tyr和Val表观代谢率较高，Met、Cys、Thr和Glu表观代谢率较低。
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