摘要
子宫内膜炎是一种奶牛产后的常发疾病，患病奶牛通常产奶量下降，受孕期延长，甚至不孕及淘汰，给我国以及全球奶牛产业带来了严重的社会经济损失。微生物在子宫内大量繁殖是诱发子宫内膜炎的最主要原因，化脓隐秘杆菌作为一种机会致病菌，可以存在于健康奶牛的生殖道内，构成正常的生物菌群，但由于生产过程中子宫内环境发生变化，化脓隐秘杆菌趁机入侵并在子宫内定植，引起子宫内感染。本研究通过采集来自中国西北地区11个牛场患有子宫内膜炎奶牛的105份子宫黏液样品，分析其主要病原菌，并对50株化脓隐秘杆菌的毒力基因，耐药表型及耐药基因，以及生物被膜形成能力进行检测，以期为临床治疗提供依据，为子宫内膜炎综合防控提供指导。 1.通过对来自甘肃，宁夏，陕西三个省份11个牧场的105份子宫黏液样品进行病原菌分离鉴定，共计得到187株菌株，主要包括化脓隐秘杆菌50株(26.7％)，大肠杆菌37株(19.8％)，链球菌34株(18.2％)，芽孢杆菌19株(10.2％)及其他种属的细菌47株(25.1％)。其中，化脓隐秘杆菌在各种类型的病原菌中占比最高，且平均检出率为47.6％。 2.所有的化脓隐秘杆菌菌株都携带有plo、fimA、fimC及nanP基因，fimE、fimG、nanH及cbpA基因分别存在于98.0％，10.0％，94.0％，78.0％的菌株中。不同牧场来源的菌株毒力基因携带率存在一定的差异。此外，62.0％的菌株毒力基因类型为plo/fimA/fimC/fimE/nanP/nanH/cbpA，为本研究中化脓隐秘杆菌的主流毒力基因谱。 3.采用微肉汤稀释法确定了8种抗生素对50株化脓隐秘杆菌的最小抑菌浓度，所有菌株都对青霉素及利福平敏感，且MIC的值都分别小于0.063μg/mL和0.008μg/mL。92.0％的菌株对左氧氟沙星敏感，MIC范围为0.5～8μg/mL，76.0％的菌株对红霉素敏感，MIC范围为0.016～4μg/mL，72.0％的菌株对克林霉素敏感,MIC为0.063～4μg/mL。此外，化脓隐秘杆菌对四环素及庆大霉素的耐药性较为严重，分别为68.0％和74.0％，MIC值分别为0.063～16μg/mL及0.5～32μg/mL。头孢噻呋的MIC范围为0.25～2μg/mL。 4.通过普通PCR检测，携带有四环素耐药基因tet(W)菌株比例为80.0％，且88.0％的菌株四环素耐药表型与基因型表现一致。红霉素耐药基因erm(X)阳性的菌株比例为12.0％，没有检测到erm(B)基因，同样88.0％的菌株红霉素耐药表型与基因型表现一致，表明化脓隐秘杆菌菌株中耐药表型和基因型之间表现出了较高的相关性。 5.利用结晶紫染色法对50株化脓隐秘杆菌生物被膜的形成能力进行定量检测，结果表明，32株(64.0％)菌株具有形成生物被膜的能力，其中25株(50.0％)菌株形成生物被膜的能力较弱。 本研究结果对指导临床合理使用抗生素，减少耐药菌株产生，提高子宫内膜炎治疗效果以及进一步探索化脓隐秘杆菌的致病机制及耐药机制具有重要的参考意义。
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