摘要
苗药赶黄草以虎耳草科(Saxifragaceae)扯根菜属(Penthorum)药食两用植物扯根菜(Penthorum chinense Pursh)干燥地上部分入药，具有清热解毒、平肝健脾、利水消肿的功效。赶黄草在苗族有上千年的药用史，被誉为“神仙草”，是苗族治疗肝脏疾病的传统药物。除传统功效外，近年来研究发现赶黄草还具有抗氧化、抗肝癌、抗炎、抗脑缺血/再灌注损伤等多种新的药理作用。植物化学研究表明赶黄草化学成分多样，涉及黄酮、木脂素、香豆素、萜类、有机酸等多种类型，以黄酮类成分为主。课题组前期研究显示赶黄草化学成分极其丰富，而目前从中分离得到的只有102个，尚有很大的研究空间。因此，本论文对赶黄草95％乙醇提取物进行化学成分研究，以期能得到更多的单体化合物，并进行活性评价，为今后赶黄草药效物质的阐明及质量标准的建立提供理论依据。 本论文综合运用大孔树脂、硅胶、ODS和SephadexLH-20等多种色谱填料柱色谱和半制备高效液相色谱从赶黄草95％乙醇提取物中分离并鉴定了40个单体化合物。包括黄酮类化合物21个，分别为槲皮素(1)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(2)、quercetin-3-O-(4"-methoxy)-α-L-rahmnopyranosyl(3)、芦丁(4)、5-羟基-3，7，4''-三甲氧基黄酮(5)、芹菜素(6)、山奈酚(7)、阿福豆苷(8)、山奈酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(9)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(10)、乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷(11)、圣草酚(12)、Pinocembrin-7-O-[β-D-apiosyl(1-2)]-β-D-glucoside(13)、eriodictyol-7-O-(6"-O-galloyl)-β-D-glucopyranoside(14)、赶黄草苷(15)、2''，4''，6''-三羟基二氢查耳酮-4''-β-D-葡萄糖苷(16)、根皮苷(17)、ThonningianinA(18)、ThonningianinB(19)、(-)-表儿茶素-3-O-没食子酸酯(20)和SCH644343(21);香豆素类化合物4个，分别是短叶苏木酚酸(22)、短叶苏木酚酸甲酯(23)、短叶苏木酚酸乙酯(24)和11-O-没食子酰岩白菜素(25);生物碱类化合物3个，分别是N,N''-diferuloyl-putrescine(27)、4-[(Z)-p-coumaroylamino]butan-1-ol(28)和(2S，3S)-aziridine-2，3-dicarboxyla(29);甾醇类化合物3个，分别是β-谷甾醇(30)、β-胡萝卜苷(31)和豆甾醇(32);其他类化合物9个，分别是2，6-dihydroxyacetophenone-4-O-β-D-glucopyranoside(26)、batatasinⅢ(33)、3，4-二羟基苯甲酸(34)、没食子酸甲酯(35)、没食子酸乙酯(36)、丁香醛(37)、octadecylferulate(38)、脱落酸(39)和7-羟基-6-甲氧基桂皮酸乙酯(40)。且化合物3，5～6，9，12～14，17，20～21，27～29，32～33，37～40为首次从扯根菜属中分离得到。 采用DPPH、ABTS法测定赶黄草中分离得到的单体化合物的抗氧化活性，以维生素C为阳性对照。结果显示化合物1～4，14，18～24和36清除DPPH自由基的IC50值在3.67±0.29～11.58±0.15μmol/L范围内，低于维生素C(IC50值为14.78±0.13μmol/L);化合物1，7，14，18～23和36清除ABTS自由基IC50值在6.03±0.08～16.14±0.17μmol/L范围内，低于维生素C(IC50值为23.53±0.18μmol/L)，表现出显著的抗氧化作用。 采用MTT法，选择人源肝癌SMMC-7721细胞株，测定赶黄草中分离得到的黄酮类化合物的肿瘤细胞毒活性。结果显示，化合物14，18和20的对SMMC-7721细胞的IC50值分别为39.11±1.54、38.46±2.40和40.22±1.17μg/mL，具有中等强度的细胞毒活性，强于阳性药5-氟尿嘧啶(IC50值为43.52±1.08μg/mL);化合物1，19和21的IC50值分别为72.54±2.31、61.86±3.53和76.17±3.10μg/mL，对SMMC-7721细胞具有弱细胞毒活性。 本论文首次从赶黄草中分离得到生物碱类和二苯乙烯类化合物，丰富了扯根菜属植物的化学成分研究结果。同时，分离得到的40个化合物中有21个为黄酮类化合物，进一步证明了黄酮类化合物为赶黄草中的主要成分。分离得到的大多数化合物都具有显著的体外抗氧化活性，为前人发现的抑制氧化应激是赶黄草发挥多种药理作用的共同机制提供了证据。本论文为赶黄草进一步的开发利用提供了理论依据。
NETL