摘要
Ipilimumab是全球首个也是目前唯一获批上市的抗CTLA-4的单克隆抗体。作为肿瘤免疫检查点抑制剂，Ipilimumab已获准单药或联合给药用于多种实体瘤的免疫治疗，并在临床上获得了显著的疗效，为广大肿瘤患者带来了新的希望。本研究建立了多种可用于检测Ipilimumab体外活性的方法:ELISA法检测Ipilimumab与rhCTLA-4结合活性的方法、FACS法检测Ipilimumab竞争抑制B7-1与细胞膜CTLA-4结合活性的方法，以及通过检测PBMC细胞中T细胞增殖与活化所表达的IL-2浓度，从而评价Ipilimumab活性的方法。对ELISA法检测Ipilimumab与rhCTLA-4结合活性和FACS法检测Ipilimumab竞争抑制B7-1与细胞膜CTLA-4结合活性的方法进行了验证，验证结果显示:两种方法的专属性和耐用性良好，模拟相对结合活性50％～200％的Ipilimumab供试品，多次活性测定的回收率在90～104％的范围内，精密度的重复性和中间精密度均小于15.0％，线性关系系数均大于0.98，说明这两种分析方法均能够真实、准确、稳定地反映Ipilimumab活性。Ipilimumab体外活性方法的研究与建立，可为国内外Ipilimumab生物类似药开发，以及以CTLA-4为靶点的创新型抗体或双特异性抗体等产品研究，提供体外活性检测方法的基础和参考。
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