摘要
目的:探究三氯生(Triclosan，TCS)对溃疡性结肠炎的影响及其机制。方法:将80ppmTCS添入Balb/c小鼠饮食中进行饲喂，首先，分别于1周末和4周末取血和肠组织进行炎症分析，收集粪便标本行16S菌群分析，观察TCS不同作用时间内，对健康小鼠肠道的炎症作用及菌群的改变。其次，建立葡聚糖硫酸钠盐(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)小鼠模型。饲喂小鼠普食或TCS饮食3周后，开始给予全部小鼠2％DSS水溶液自由饮水，饮食不变，持续1周。第四周末，取小鼠血及肠组织行炎症分析并收集粪便标本行16S菌群分析，观察TCS对UC小鼠肠道炎症作用及肠道菌群的改变。结果:在健康小鼠中，TCS干预1周后，肠道菌群中Eubacterium_fissicatenaand_nodatum门增加，Lachnospiraceae_UCG_006和Anaerotruncus门减少，Oscillibacter_sp._1-3种减少。结肠中p-NF-κb和TLR4表达增加，Occludin连接蛋白的表达降低，病理组织学损伤评分高于对照组，提示TCS对小鼠结肠有潜在的炎症损伤作用。TCS干预4周后，小鼠肠道菌群中Proteobacteria门增加，硫酸盐还原菌属(sulfate-reducing bacteria，SRB)的丰度明显升高，产丁酸盐的益生菌Lachnospiraceae属和种减少。结肠中Occludin进一步减少，TLR4的激活进一步增加。镜下提示TCS干预4周对健康小鼠肠道有损伤作用，但干预一周和四周作用无差异。在UC小鼠模型中，TCS增加了肠道菌群中Prevotella_1，硫酸盐还原菌Desulfovibrio和拟杆菌Bacteroides的丰度，减少了Bifidobacterium_animalis和uncultured_Alistipes_sp.的丰度。TCS的干预增加了UC小鼠血浆中IL-13浓度及结肠中炎症因子IL-10、IL-13、IL-17、TNF-α、IFN-γ、p-NF-KB的表达，减少了Occludin蛋白。镜下观察TCS干预后肠粘膜及腺体破坏损伤程度、炎细胞浸润程度，以及腺体细胞异型性改变均明显加重。结论:三氯生可通过破坏肠道菌群稳态诱发和加重溃疡性结肠炎，其可能的促炎机制为:三氯生导致肠道菌群紊乱，其主要特征为:减少菌群多样性，改变菌群结构，表现为以硫酸盐还原菌和拟杆菌为主的有害菌增多，产丁酸盐菌为主的益生菌减少。同时，三氯生通过减少Occludin紧密连接蛋白破坏肠粘膜屏障，增加粘膜通透性，导致细菌移位，激活TLR4-NF-κb炎症通路，促进Th1、Th2和Th17相关炎症因子释放，造成肠粘膜损伤。
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