摘要
多糖是大枣中重要的活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、保肝以及抗癌等多种生物活性，可广泛应用于功能保健食品。哈密大枣是中国新疆地区有名的地方特产，因其个大、皮薄、核小、肉厚、颜色好、含糖量高，干而不皱等优点，在国内外市场上驰名。研究表明，哈密大枣含糖量高，但对哈密大枣多糖的结构及生物活性尚未进行深入研究。本文以新疆哈密大枣为原料，研究其多糖提取工艺、分离纯化、结构表征以及体内外抗氧化活性。 主要研究结果如下： (1)哈密大枣多糖提取工艺优化：采用响应面法优化哈密大枣多糖的超声提取工艺，最优工艺参数为超声功率200W、超声时间24min、液料比16∶1mL/g、超声温度48℃，得率为(3.11±0.45)%。 (2)哈密大枣多糖分离纯化：脱脂脱蛋白后的粗多糖(HJP)经DEAE-52纤维素柱和SephadexG-100葡聚糖凝胶柱层析分离纯化后，得到4个组分HJP-1a、HJP-2、HJP-3和HJP-4。 (3)哈密大枣多糖结构表征：通过HPAEC和HPGPC-MALLS/RID测定了哈密大枣多糖组分的单糖组成和分子量大小，结果表明：HJP-1a主要由阿拉伯糖和半乳糖组成，比例为56.93∶19.99，平均分子量为3.115×104Da；HJP-2、HJP-3和HJP-4平均分子量分别为4.590×104、6.986×104和1.951×105Da，都是以半乳糖醛酸、阿拉伯糖和半乳糖为主的均相杂多糖；采用FT-IR分析结果显示，HJP-1a中存在β-糖苷键，HJP-2存在D-吡喃葡萄糖环，HJP-3和HJP-4中存在α型糖苷键。综合单糖组成、核磁和甲基化实验结果可知HJP-3的主链包含两个单元：T-α-L-Araf(1→5)-α-L-Araf(1→4)-β-D-GalpA(1→和T-β-D-Galp(1→2,4)-α-L-Rhap(1→。 (4)哈密大枣多糖抗氧化活性研究：通过体外(总还原力、ABTS自由基清除能力以及细胞实验)和体内斑马鱼模型实验分析不同纯化多糖组分的抗氧化活性。结构表明：4个纯化多糖的ABTS自由基清除能力以及总还原力均随多糖浓度增大而升高，抗氧化活性与糖醛酸水平成正相关，顺序为HJP-2＞HJP-4＞HJP-3；4个纯化多糖组分均能够减轻H2O2对HepG2细胞的氧化损伤和对MET损伤的斑马鱼胚胎具有不同的保护作用。 上述结果表明，四个纯化多糖均具有体内和体外抗氧化活性，能够减轻氧化损伤，为红枣多糖应用于保健品及天然药物的研发提供理论支持。
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