摘要
根结线虫(Meloidogyne spp.)是园艺和大田作物上最具经济破坏性的植物寄生线虫属之一，每年在全球造成的损失约为1000亿美元，严重制约世界农业的发展。现代农业中，化学防治为主要的根结线虫病防治方法，但由于化学防治产生的种种问题，人们逐渐的将视野转移到生物防治方面。本研究从生防菌株的筛选入手，从10个地区的番茄植株根际土样品中筛选对南方根结线虫具有生防效果的细菌菌株，以发酵上清液杀虫活性试验的结果为依据选取生防效果最好的菌株，对其进行分类鉴定，活性物质基本性质的研究，以及挥发性活性物质成分的提取鉴定和分析，并根据分析结果购买化合物标品验证杀虫活性。主要结果如下： (1)根结线虫生防菌株的筛选。通过南方根结线虫触杀体系，对筛选到的85株细菌进行摇瓶发酵并利用48h的发酵上清液进行杀虫活性试验，校正死亡率超过50%有7株，超过80%有3株，其中有1株校正死亡率为91.75%，编号为AMCC1020。 (2)菌株鉴定。通过形态学、Biolog生理生化测定和16SrDNA的分子生物学鉴定方法，确定AMCC1020是一株松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)。 (3)活性物质基本性质。发酵时间试验结果表明，AMCC1020在BPY液体培养基中发酵时间为48h时杀虫活性达到最大；经过不同温度、pH值、贮藏时间条件处理后验证对杀虫活性物质的影响，结果表明，该株菌的杀虫活性物质耐酸不耐碱，具有良好的温度稳定性和贮藏稳定性；通过传代培养后测试杀虫活性，发现菌株具有良好的传代稳定性；通过溶媒萃取法试验后发现活性物质无法通过正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷和环己烷这四种有机溶剂萃取的方法进行有效研究。 (4)挥发性活性物质的提取分析与鉴定。首先通过旋转蒸发和重溶的方法确定了AMCC1020产生的杀线虫活性物质是挥发性物质后，利用固相微萃取(SPME)技术对挥发性活性物质进行提取，结合气质联用(GC/MS)技术对活性物质分析鉴定。最后鉴定挥发性活性物质共10种，分别属于酸、醇、酯、醛、烷烃类物质。 (5)标品杀虫试验。根据分析鉴定的结果，购买挥发性活性物质标品对南方根结线虫二龄幼虫进行杀虫活性试验，最终发现2种物质具有很高的杀虫活性。测定了这两种物质对南方根结线虫二龄幼虫12h的LC100，其中冰乙酸12h的LC100为0.1μL·mL-1，β-苯乙醇12h的LC100为0.8μL·mL-1。 综上，通过筛选鉴定得到的StaphylococcussciuriAMCC1020是一株杀虫效果良好的菌株，其杀线虫挥发性活性物质的分离纯化与研究可以为新型杀线虫剂的研制提供参考。
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