摘要
目的： 目前骨质疏松患病率极高，但的常用治疗药物均有较严重的并发症。使用中药治疗疾病具有并发症少等特点，随着科技的发展，提取中药中有效成分治疗疾病是一大热点。鹿茸多肽是鹿茸的主要活性物质，PAP在体外已发现具有抑制破骨细胞的作用。本研究阐明了PAP治疗绝经性骨质疏松的作用途径。 方法： 为了确定PAP在体外的作用，分离4周龄C57BL/6小鼠骨髓巨噬细胞，分别检测PAP对骨髓巨噬细胞的细胞活性、增殖和凋亡的影响、用qRT-PCR检测TRAP的表达和TRAP染色来确定PAP对骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞的影响。为了确定PAP在体内的作用，对12周龄SPF雌性C57BL/6小鼠进行卵巢切除或假手术，建立绝经后骨质疏松症动物模型，并利用CTX-1和病理学特征来确定PAP的作用。为了确定PAP通过什么途径抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞，使用条件性敲除破骨细胞TLR4基因的4周龄C57BL/6小鼠进行实验，使用蛋白质印迹法确定是否敲除成功、使用qRT-PCR实验检测TRAP的表达和TRAP染色来确定PAP是否通过TLR4信号通路抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞。为了确定PAP在体内是否也通过TLR4信号通路抑制骨吸收，我们对12周龄SPF雌性TLR4f/f小鼠和TLR4Ctsk小鼠进行卵巢切除或假手术，建立绝经后骨质疏松动物模型，并利用MicroCT来确定PAP在体内是否通过TLR4信号通路抑制骨吸收。 结果： PAP在体外对骨髓巨噬细胞增殖、凋亡、细胞活性影响无统计学差异(P＞0.05)，对抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞有统计学差异(P＜0.05)。PAP在体内对抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞有统计学差异(P＜0.05)。对于TLR4条件性敲除的骨髓巨噬细胞，PAP抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞(无统计学差异(P＞0.05)。对于TLR4条件性敲除的小鼠，PAP对骨体积分数、骨小梁厚度的影响(无统计学差异(P＞0.05)。 结论： PAP在体外能抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞，在体内能通过抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞抑制骨吸收。对于绝经性骨质疏松，PAP能通过TLR4信号通路抑制骨髓巨噬细胞分化为破骨细胞，抑制骨吸收。
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